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BD流式液相多重蛋白定量技术
BD CBA使用手册
目 录
一. 前言 1-1
以Th1/Th2/Th17试剂盒为例 2-20
二. BD CBA标准操作流程 ( )
1.概述 2-5
2.使用须知 5-7
3.实验准备 7-9
4.流式细胞仪的调整9-12
5.实验操作 12-15
6.数据性能 16-20
三. 文献应用汇总21-27
四. Q A 常见问题及答案 28-32
( )
一. 前言
Cytometric Bead Array (CBA) 即微量样本多重蛋白定量技术 是一个基
, ,
于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法 它能够同时对单个样品中的多
。
个指标进行检测 日常实验中 常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检
。 ,
测 如细胞培养上清或血清血浆中的细胞因子含量的定量分析 由于这些因子
, 。
的含量较少 低于一般常规方法的检测下限 使用传统的蛋白检测方法很难检
, ,
测 同时由于样本量少 一次只检测一个因子的方法难以实现多个因子的检
。 ,
测 而且费时 BD公司利用流式细胞仪对荧光信号检测的高灵敏性 以及同
, 。 ,
时可区别多种荧光及多种荧光强度的特性 将受检的可溶性因子附着于一些具
,
有近似细胞直径的微粒上 即可对受检样品中的多种可溶性因子进行检测 为
, 。
此 BD公司开发了的微量样本多重蛋白定量系统 简称CBA系统 首先利用一
, , 。
系列带有荧光标记的微球连结特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物 然
,
后再通过相对应的各种不同检测物特异微球上的不同荧光强度同时定量测定分
析样本中多种可溶性成分。
BD的CBA系统的工作原理简单 对应受检系统中的每一个检测指标都有不
,
同的捕获微球 不同的捕获微球上包被有特异的捕获抗体 并具有不同的荧光
。 ,
强度 捕获微球与待测样品溶液混合后 微球上的特异性抗体首先与样品 (血
。 ,
清 血浆或细胞培养液) 中的相应抗原或蛋白结合 然后 与加入的荧光标记的
、 。
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