临床微生物标本采集方法-可用剖析.ppt

医务人员手采样的意义： 1、引起医源性感染的因素很多，医务人员手可以充当医源性感染的媒介，手的微生物污染是造成医院感染的最直接的传播途径，由于医务人员的手传播的细菌而造成的医院感染约占30%。因此医护人员做好手的清洁消毒是控制医院感染的重要措施之一。 2.促进医务人员手卫生的依从性。 3.进行流行病学调查。 物品准备 酒精灯外焰烧灼采样试管管口，用无菌棉签蘸取中和试剂 被检者卫生手消毒后，双手五指并拢，用棉拭子在一手曲面从指跟到指端往返涂擦2遍，涂擦过程中同时转动棉拭子；同法采集另一只手 取无菌剪刀，酒精灯外焰烧灼采样试管管口 剪去棉拭子手接触部分投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内；酒精灯外焰烧灼试管管口后盖上瓶盖 十、外科手消毒效果采样 物品准备：无菌棉拭子、试管架、含中和剂的无菌洗脱液、灭菌剪刀、酒精灯、打火机、采样单、采样记号笔、手消毒剂 被检者着装规范，外科手消毒后保持双手位于胸前并高于肘部 取无菌棉签2根浸蘸含相应中和剂的洗脱液 一根棉签，涂擦一手五指曲面，从指跟开始至指端，每指跟到指端往返转动涂擦2次，一个手涂擦面积约30c㎡；另一只手同样涂擦 剪去棉签手接触部位，两个棉签投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内 试管塞用酒精灯烫后塞住试管口 在试管上标记被检者姓名、采样时间 填写手卫生消毒效果检测申请单，及时送检 消毒试管口：将试管放在酒精灯上旋转进行消毒，此为重要步骤。 无菌法取注射器 用无菌注射器抽取使用中的消毒剂1ml 将抽取的消毒剂注入含9ml中和剂的试管内，注意不接触试管口 再次用酒精灯消毒试管口 将消毒剂与中和剂振荡充分混匀 用记号笔在试管壁编写号码，送检 备注：中和剂的选择： 1、醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。 2、含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒 剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂。 3、氯与定、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温- 80和0.3卵磷脂的中和剂。 4、醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。 5、含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中 加入吐温-80到0.3%，也可使用经该消毒剂消毒 效果监测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。 六、洁净手术室空气沉降菌采样 一、采样前准备 1、当日术毕，按常规对手术间所有物表及地面进行湿式清洁和擦拭。 2、检查净化空调系统运作是否正常，当日完成手术间清洁后，调节空调系统处于待机状态，次晨打开系统运行30min。自净后采样。 二、采用平板沉降法 1、采样时间: 在净化空调开启30min进行采样，采样时洁净手术室大门应保持关闭，以维持手术室正压状态和洁净度。 2、采样护士准备： 在采样前应洗手（或手消毒） 戴口罩，帽子，穿无菌衣。操作时应轻稳，避免污染培养皿。 3、采样方法： 把琼脂平板放在室内各采样点，采样时把平板盖打开扣放于平板少许边沿上，同时培养皿下垫灭菌疗巾，暴露30min后，盖上平板盖，并作好手术间标志及平板上注明手术区和周边区，固定培养皿，放指定容器内。防再次污染。 4、采样顺序： 采样时平板应从科室最靠内的房间放置，依次向外布放，每个手术间也是从最靠里的位置放置平板，最后放置最靠门的采样点。采样点分布均匀，收取平板顺序相反。 5、布点要求： 百级手术间，手术区（手术台两侧0.9m以内，两端0.4m内）呈对角线，东南西北中5点，周边区（距墙1m，每边2个）8点，共需13个培养皿；千级手术间，手术区（手术台两侧0.6m以内，两端0.4m以内）呈单角线3点，周边区（距1机，长边2个，短边1个）6点，共需9个培养皿；万级手术间:手术区（手术台4边，0.4m以内）呈对角线3点，周边区（距离1m每边1个）4点，共需7个培养皿。检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作将一个对照皿打开后立即封盖，两个对照结果必须为阴性，整个操作过程应符合无菌要求。 6、采样高度： 洁净手术间的手术区采样高度为0.8-1.2m,周边区在地面或0.8m采样，与《医院洁净手术部建筑技术规范》要求高度相符。 7、培养条件： 采样后的培养基按要求送至化验室（细菌定）在37℃培养箱培养，24h观察结果。 8、判断结果： （1）百级洁净手术间手术区小于 0.2cfu/30min,周边区小于0.4cfu/30min （2）千级洁净手术间手术区小于 0.75cfu/30min,周边区小于 1.5cfu/30min。 （3）万级洁净手术间手术区小于 2cfu/30min,周边小于4cfu/30min. （4）普通手术间小于5cfu/30min. 百级手术间 千级手术间 万级手术间 十万级手术间 注意事项