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生物电化学分析技术
电化学免疫分析方法;免疫分析;immunoassays;免疫
传
感
器;一、免疫球蛋白的基本结构; 抗原抗体反应
Antigen-antibody reaction ;定义;原理;特点;为什么抗原抗体结合在比例恰当时能形成大块聚合物?
Marrack(1934)网格学说;影响抗原抗体反应的因素; 酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称ELISA):
在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques) 上发展起来的一种新型免疫测定技术,ELISA过程包括:抗原吸附在固相载体上,这个过程称为包被,加待测抗体, 再加相应酶标记抗体,生成抗原--待测抗体--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。待测抗体的量与有色产物成正比。同理也可包被抗体,测定抗原含量。 ELISA最常用的四种方法:直接法测定抗原;间接法测定抗体;双抗体夹心法测定抗原;竞争法测定抗原。
;
(1??? 直接法测定抗原
A.????? 将抗原吸附在载体表面;
B.????? 加酶标抗体,形成抗原—抗体复合物;
C. 加底物。底物的降解量=抗原量。
;(2)间接法测定抗体
A.????? 将抗原吸附于固相载体表面;
B.????? 加抗体, 形成抗原-抗体复合物;
C.????? 加酶标抗体;
D. 加底物。 测定底物的降解量=抗体量。
;(3)双抗体夹心法测定抗原
A.????? 将抗体吸附于固相表面;
B.????? 加抗原,形成抗原-抗体复合物;
C.???? 加酶标抗体;
E. 加底物。底物的降解量=抗原量。 ; (4)竞争法测定抗原
A.???? 将抗体吸附在固相载体表面;
B. 加入酶标抗原和待测抗原,竞争结合抗体; 对照只加入酶标抗原;
C. 加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差=未知抗原量。;免疫学反应举例;免疫标记技术:;免疫标记技术:——免疫酶技术
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