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第三章 非金属化合物及其 代谢产物的测定 王长芹 卫生检验学教研室 第一节 一氧化碳 第二节 二硫化碳 第三节 硒 第四节 碘 第五节 砷 第六节 氟 第七节 氰化物 1. 了解一氧化碳、二硫化碳、碘、砷、氟和氰化物的理化性质，测定它们的卫生学意义； 2.熟悉样品的采集、保存和处理方法；硒、碘、氟与人体健康的关系； 3. 掌握一氧化碳、二硫化碳、碘、砷、氟和氰化物的生物检验指标，以及主要的测定方法。 第一节 一氧化碳 一氧化碳（carbon monoxide，CO） 无色、无臭、无刺激性的有毒气体 燃烧时呈蓝色火焰；爆炸限为12%～74% 难溶于水，易溶于氨水 硫化羰基，金属羰基化合物，具有还原性 二、代谢和生物检测指标 进入机体途径及代谢过程 三种途径: 呼吸道、消化道、皮肤 生物监测指标 人体接触CO3h后血中HbCO浓度升高最快，停止接触，HbCO浓度迅速下降。CO中毒的临床表现与HbCO浓度有关。 三、样品采集及保存 1.呼出气 2.血液 四、血中碳氧血红蛋白的测定 （一）分光光度法 1.取不吸烟，不接触一氧化碳气体的健康人血2ml（加肝素抗凝），保存待用。 2.取一5 ml试管，吸此原血0.5 ml，用Tris液（三羟甲基氨甲烷）2 ml稀释。 3. 取上述稀释血0.15～0.2ml，放入100ml锥形瓶中，加入60mlTris液混匀。 4. HbO2液的制备：将上述血液稀释液通氧气20min（30ml／min）。 5.HbCO液的制备：取HbO2液的一半，放入干燥的50ml锥形瓶，通一氧化碳20min（30ml／min）。 6.取一10ml试管，装满HbCO液，再加入连二亚硫酸钠40mg。盖塞（勿进气泡），混匀，待测。 7.Hb液的制备：将剩余的一半HbO2液通湿化氮气（即将氮气通过盛有常温蒸馏水的容器，使水蒸气饱和），15min后，装满另一支10 ml试管。并加入40 mg连二亚硫酸钠，盖塞（勿进气泡），混匀待测。 8.将试剂空白管和测定管待测液分别倒入1cm比色皿中。加盖（勿进气泡）。以试剂空白液调零点，测定HbCO液及Hb二液在420、432nm波长的吸光度。 取血样10μl，用Tris稀释液稀释后加入连二亚硫酸钠，混匀。以试剂空白液为参比，记录测定液420nm和432nm波长下的吸光度值。 （1）采血：避免凝血；血样：新鲜 （2）所用氮气和氧气：高纯氮和高纯氧 （3）连二亚硫酸钠：小瓶分装，避免接触空气和水分。 （4）测试液避免接触空气，及时测定。 （二）氢氧化钠法 1. 原理 正常人血样在碱性条件下立即转变成草绿色，而存在碳氧血红蛋白会使颜色转变时间增长，转变时间与碳氧血红蛋白浓度之间有相关性，从变色时间可大致估计出碳氧血红蛋白的浓度。 2. 测定方法 取耳血或指血1～2滴（0.02ml），置于装有4ml蒸馏水的试管中，混匀，呈粉红色。 然后向试管中加入2滴10％的氢氧化钠溶液。 五、终末呼出气中一氧化碳浓度测定 （一）一氧化碳测定仪法 一氧化碳红外测定仪，利用一氧化碳对4.67μm、4.72μm波长的红外辐射有选择性吸收的原理定量。 一种检出或测定痕量气体的装置。 1919年美国C.R.胡佛和A.B.拉姆首先在分析化学中使用检气管。 检气管的管壁透明，管内装多孔粒状载体，上面有检出试剂，当试样气体流经管道时，被测组分与检出试剂作用，使试剂变色。根据进入的试样量和试剂变色的深浅或变色部分的长短，借助于标准色阶，就可确定组分的含量。 第二节 二硫化碳 2-硫代噻唑烷-4-羧酸（TTCA）是二硫化碳的体内代谢产物，是二硫化碳与谷胱甘肽结合所生成的特异性代谢产物。 二、代谢和生物监测指标 二硫化碳的接触：主要是职业接触 二硫化碳对人体毒作用：气体麻醉剂 二硫化碳在体内的代谢：呼吸道和皮肤 3.生物监测指标 2-硫代噻唑烷-4-羧酸（TTCA） 终末呼出气中二硫化碳 三、样品采集和保存 1.尿 样 工作班末或周末、避免污染、尽快测定 2.呼出气 脱离工作现场正常呼吸1min后、采气管、24h内测完 四、尿中2-硫代噻唑烷-4-羧酸的测定 尿中TTCA含量的表示方法 TTCA排泄速度 肌酐校正TTCA的值 尿TTCA浓度 高效液相色谱法 高效液相色谱法测定尿中TTCA 尿样经盐酸酸化 样品处理 取适量班末尿样离心后加入盐酸和乙醚，于液体快速混匀器上混合2min。3000r/min离心后，将乙醚层全量转移至另一试管，置40℃水浴吹氮至干，加入甲醇溶解残渣，待测。 注意事项 1.离心后得尿样经乙醚提取后再次离心。使乙醚便于分离、转移，保证准确度。 2.TTCA的制备 2.色谱测定条件 载气（N2）；热解吸温度140℃，解吸时间3min；火焰光度