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- 2017-06-02 发布于广东
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第十四讲蛋白芯片和组织芯片
蛋白芯片和组织芯片 第十四讲 蛋白质组学(proteomics) 以细胞内全部蛋白质的存在及其活动方式为研究对象 蛋白质组学不同于传统的蛋白质学科之处在于它的研究是在生物体或其细胞的整体蛋白质水平上进行的,它从一个机体或一个细胞的蛋白质整体活动的角度来揭示和阐明生命活动的基本规律。 蛋白芯片 蛋白芯片是微缩化的如ELISA的免疫检测方法 跟DNA芯片类似,蛋白芯片是把抗原、抗体、多肽样本高密度地点制在芯片上,使多种样本能同时得到检测 可借用DNA芯片产业的成熟经验,如点样仪,扫描仪,图像处理,蛋白芯片的制备以蛋白共价结合在玻片上为主,便于快速和自动处理 提高了蛋白质鉴定的速度与重复性,在蛋白质的生物活性以及大分子与蛋白质之间相互作用等方面展示了独有的魅力 蛋白芯片的操作流程 点样样品的准备:蛋白的纯化,并将蛋白溶解于点样液中 点样 点样后:洗涤洗去未结合的蛋白质 蛋白芯片的封闭(blocking) 将待检的蛋白样品或小的分析物加入到蛋白芯片上;加入蛋白质样品与芯片进行抗原抗体反应 洗涤、检测 在上述各步中要特别注意降低非特异的结合,同时增强检测的灵敏度和精确度 芯片制备 芯片制备的方法包括机器人接触式点样、压电喷墨点样。这与DNA芯片相似。 为达到蛋白质组学分析中揭示蛋白表达特征(包括蛋白质修饰)、蛋白质相互作用、蛋白质的功能等目的,要将蛋白质固定在固相支持物的表面,并保持其原
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