11细胞增殖和其调控2.pdfVIP

第十一章 细胞增殖及其调控 Cell proliferation and Regulation 伍家发 食品与生物工程学院 2009.5 第三节 细胞周期的调控 细胞周期运转受到细胞内外各种因素的精密调控， 细胞内因是调控依据。研究发现，周期蛋白依赖性CDK 激酶是细胞周期调控中的重要因素。 关于细胞分裂机制的研究是在三个不同领域开展 非洲爪蟾卵细胞及哺乳类培养细胞的研究，发现MPF； 对芽殖酵母和裂殖酵母的研究发现cdc基因； 对海胆胚胎发育早期卵裂蛋白的合成的研究，发现周期 蛋白。 一 MPF的发现及其作用 MPF，即卵细胞促成熟因子（maturation- promoting factor），或细胞促分裂因子 （mitosis-promoting factor），或M期促 进因子（M phase-promoting factor） 1 PCC的研究： Premature chromosome condensation,PCC （早熟染色体凝集）:与M期细胞融合的间 期细胞发生的形态各异的染色体凝集现 象。 早熟染色体凝集 G1期×M期：细线状； S期×M期：粉末状； G2期×M期：双线状； M期细胞可以诱导PCC，提示在M期细胞中可能存在一种 诱导染色体凝集的因子，称为细胞促成熟因子。 2 MPF的发现——非洲爪蟾卵细胞质注射实验 分为Ⅰ-Ⅵ期。Ⅰ-Ⅳ期为生长阶段，发育到Ⅳ期时细 胞达到一定体积，停止生长，等待成熟。 在孕酮的刺激下，GV破裂，染色体凝集，并进行第一 次减数分裂。之后又马上进行第二次减数分裂，并停 留在中期。 卵细胞提取物注射实验 实验表明成熟的卵细胞的细 胞质中，有一种物质（MPF） 可以诱导卵细胞的成熟。 1988年，Maller实验室以非 洲爪蟾的卵母细胞为材料， 得到纯化的MPF，含p32和p45 两种蛋白，二者结合后，具 蛋白激酶的活性。 二 p34cdc2激酶的发现及其与MPF的关系 1. L.Hartwell等酵母遗传学家所做的工作 （1）cdc基因（cell division cycle gene） 酵母细胞中与细胞分裂和细胞周期调控有关的基 因。如cdc2、cdc25、cdc28。 （2）裂殖酵母的cdc2基因 第一个被分离出来的cdc基因； 表达产物：相对分子质量为34×103 Da的蛋白 p34cdc2，具有蛋白激酶活性，被称为p34cdc2激酶。 在G1/S转换和G2/M转换上都发挥作用 （3）芽殖酵母的cdc28基因 继cdc2基因之后第二个被分离出来的cdc基 因； 表达产物： p34cdc28的蛋白激酶，在G2/M转换 过程中起中心调节作用，同时对G1/S转换也是 必需的。 不管是p34cdc2，或是p34cdc28，其本身并不具有 激酶活性，只有当其与有关蛋白（p56cdc13 ）结 合后，其激酶活性才能够表现出来。 实验证明， p34cdc2、p34cdc28与MPF的p32同源 p56cdc13与MPF的p45有什么关系? 2 周期蛋白的发现 1983年，Tim Hunt以无脊椎动物海胆卵 为材料进行细胞周期调控的研究，通过 35S-Met标记示踪，在海胆卵中发现两种 特殊蛋白质（A、B，分子量约45- 60kD），其含量随细胞周期进程变化而 变化，将之命名为周期蛋白。 实验表明周期蛋白可能参与MPF的功能调 节。研究证实MPF的p45为周期蛋白B 序列分析表明p56cdc13和周期蛋白B同源 MPF的生化实质 不同来源的MPF的功能相同，但组成上不一定相同。 非洲爪蟾、两栖类 MPF=p32+ p45 裂殖酵母 MPF=p34cdc2+ p56cdc13 芽殖酵母