动物检验检疫新技术.ppt

动物检验检疫新技术 现代生物技术和现代信息技术的飞速发展及广泛应用，给动物检疫带来了深刻的影响，为动物疫病的诊断、检测、监测、处理等提供了更为快速、准确和高效的技术与方法。 本次讲座简要介绍现代生物技术和信息技术基本类别与原理的基础上，重点分析现代生物技术和信息技术在动物检疫领域中的应用，并初步探讨现代技术检疫应用的未来发展。 现代生物技术及其发展 现代生物技术以现代生物学作为理论基础，由生物学、免疫学、化学、物理学、信息学等多种学科理论和技术相互交叉融合而成，其发展与材料、信息、传感器、图像处理、微机电系统等多种技术的发展息息相关，因而现代生物技术已经突破传统生物学的范畴，成为研究现代生物学的必备工具和重要手段。 基因工程 细胞工程 酶工程 发酵工程 蛋白质工程 免疫血清学技术基础 分子生物学技术基础 免疫血清学技术基础 免疫学技术是指利用抗原、抗体、免疫组织、免疫细胞、免疫分子等相互作用时发生的特异性反应，同时结合反应组分的特性、标记技术、图像处理技术等建立的检测和分析方法，因而具有较强的特异性和敏感性。 免疫血清学技术在动物检疫中应用最广泛，主要包括中和试验、凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、免疫荧光抗体技术，放射技术，免疫技术、免疫酶标记技术、胶体金标记技术、免疫电镜技术。 抗原抗体反应 Reaction of Antigen and Antibody 抗原抗体反应的基本原理？ 1、 特异性  所谓特异性，即一种抗原只能和由它刺激产生的抗体相结合，不能跟与它无关的抗体发生反应。这种特性是由抗原的决定簇基于抗体可变的的化学组成、空间立体构型所决定的。例如白喉抗毒素只能与相应的外毒素相结合，而不能与破伤风外毒素结合。但由于较大分子的蛋白质常含有多种抗原表位。如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原表位，或抗原、抗体间构型部分相同，都可出现交叉反应。 2、比例性 抗原一般都是多价的，而抗体（IgG）则是二价的，只有二者比例适合时，抗原抗体才能结合得最充分，形成的抗原抗体复合物最多，反应最明显，结果出现最快，此称为等价带（zone of equivalence）。 如抗原或抗体过多，则二者结合后均不能形成大的复合物，不呈现可见反应，称此为带现象（zone phenomenon），出现在抗体过量时，称为前带（prezone），出现在抗原过剩时，称为后带（postzone）。 3、可逆性 抗原与抗体的结合虽具有稳定性，但由于二者之间是非共 价键结合，因此又是可逆的，在一定条件下可解离，且解离后各自生物活性不变。抗原抗体复合物的解离取决于两方面的因素，一是抗体对相应抗原的亲和力，二是环境因素对复合物的影响。 4、分阶段反应 抗原抗体反应可分为两个阶段： 第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应。 第二为可见反应阶段，抗原抗体复合物在环境因素（如电解质、pH、温度、补体）的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的生物现象等肉眼可见的反应。此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。 5、敏感性 抗原抗体不仅有高度特异性，还具有较高敏感性，不仅可用于定性，还可用于检测极微量的抗原抗体，其灵敏程度大大超过当前应用的常规化学方法。但反应的类型不同，其敏感性有很大的差异。 反应的组成成分 1）抗原 2）特异抗体 3）环境因素 基本因素：0.85%NaCl作电解质 反应温度: 37℃或56℃ pH : 7.0 特殊因素:补体 四 、主要的抗原抗体反应 1、凝集反应（Agglutination) 2、沉淀反应(Precipitation) 3、补体结合试验(Complement fixation test ,CFT) 4、中和试验(Neutralization test) 5 、免疫标记 表 凝集反应（Agglutination) 颗粒性抗原（完整的细菌细胞或红细胞等）与其相应的抗体在适合条件下反应并出现凝集团块的现象。 用于凝集反应中的抗原称凝集原(agglutinogen)。 用于凝集反应中的抗体称凝集素（agglutinin)。 凝集反应 直接凝集反应 间接凝集反应 (一)直接凝集试验 玻板凝集反应 试管凝集反应 (二) 间接凝集反应(Indirect agglutination test) 正相间接凝集试验 (抗原加载颗粒） 反相间接凝集试验