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基于巯基席夫碱镍配合物修饰纳米金探针的无标记阻抗型h …
基于巯基席夫碱镍配合物修饰纳米金探针的无标记阻抗型h-IgG生物免疫传感器的研究
袁帅1,2 ,刘峥*1,2,刘洁1,2,刘冉1,2
(1.桂林理工大学化学与生物工程学院,广西 桂林 541004
2.有色金属及材料加工新技术教育部重点实验室,广西 桂林 541004)
摘要 通过自组装的方法依次将L-半胱氨酸、戊二醛、Anti-IgG以及h-IgG抗原牢牢的固定在裸金电极的表面,制备成具有高生物活性的h-IgG生物免疫传感器。对无标记生物免疫探针进行了优化和选择,最终确定巯基席夫碱镍配合物修饰纳米金作为检测探针。采用交流阻抗图谱法,对生物免疫传感器的制备以及检测过程进行了表征,经过ZSimp Win软件拟合发现而且随着检测抗原浓度的增加,表现出来的阻抗值越来越大。确定了h-IgG定量检测分析的工作曲线,在h-IgG浓度范围为10ng/mL~100ng/mL时工作曲线为ΔRP=-60.23+1.147×1011×Ch-IgG,其 R2为0.9997,检出工作限Lim-D为4.54×10-10g/mL,相对标准偏差R.S.D%为0.55%。研究表明所研究的无标记阻抗型h-IgG生物免疫传感器具有灵敏度高、稳定性和重现性好等优点。
关键词 巯基席夫碱,纳米金探针,免疫球蛋白G IgG)The research of unmarked impedance type h-IgG Biosensor based Thiol Schiff-nickel complex modified gold nanoparticle probes
(Yuan Shuai, Liu Zhen※1,2,Liu Jie1,2,Liu Ran1,2)
College of Chemical and Biological Engineering Guilin University of Technology,Guilin 541004
Key Lab of New Processing Technology for Nonferrous Metals and Materials Ministry Education, Guangxi Guilin 541004 )
Abstract The high biological activity of the immune sensor prepared though self-assembly method followed by the L-cysteine, glutaraldehyde, the Anti-IgG and h-IgG antigen firmly fixed on the bare gold electrode surface .Though to unmarked biological immune probe optimization and selection,Select thiol Schiff Base Nickel Complex Modified Gold Nanoparticles as the detection probe of the experiment.Characterized the preparation and testing process of the immunosensor with AC impedance spectroscopy method .With the increase in the concentration of antigen detection, demonstrated by the increasing impedance values fitting after ZSimpWin software.The h-IgG concentration range of the 10ng/mL ~ 1000g/mL( R2 =0.9979),Lim-D is 4.54
×10-10g/mL,R.S.D% is 0.5%.Moreover,the immunosensor exhibited high sensitivity,long-term stability and good selectivity.
Key words thiol schiff, gold nanoparticle probes, IgG, AC impedance, Unmarked
0 引言
随着科技的发展,结构新颖、具有特殊功能席夫碱配合物研究受到广泛关注,特别是含巯基官能团的席夫碱及其配合物,由于其本身具有的独特的抑菌、杀菌、抗肿瘤、抗病毒的生物活性,因而在生物领域有着其独特的应用[1],但未见配合物作为无标记电化
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