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生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101
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江西省临床检验中心
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应用聚合酶链反应(PCR)技
术测定临床标本中的病原体核
酸成分,是一种高度敏感,且
最为直接的检测手段。由于临
床标本中含有蛋白质、脂类等
物质,可干扰PCR反应,故在
做PCR反应前必须进行核酸提
取。
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经典的核酸提取方法通常是加去
污剂(SDS等)裂解细胞,经蛋
白酶处理、有机溶剂提取及乙醇
沉淀等步骤。
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由于样本的处理及保存对DNA
和RNA (尤其是RNA)的影响
较大,因此在核酸测定时标本的
处理及适当保存对测定结果的准
确有效非常重要。
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临床常见的标本有血清 (浆)、
全血、分泌物、棉拭子、脓液、
体液、新鲜组织、石蜡切片等,
这些临床标本的处理和保存方法
各有不同。
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临床标本的处理
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血清(浆)标本
一些病原体,如乙肝病毒
(HBV)、丙肝病毒 (HCV)、
人类免疫缺陷病毒 (HIV)等的
PCR检测常采用血清或血浆标
本。
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HBV:标本通常由医护人员采
集,应注意避免溶血,如为血浆
标本注意抗凝剂的选择,一般
用EDTA-Na2或枸橼酸纳,不可
使用肝素。标本为全血时,及时
分离出
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