植物细胞大规模培养生产次生物质的最新研究进展与产业化现状.doc

植物细胞大规模培养生产次生物质的最新研究进展和产业化现状 摘要：本文将对植物的大规模培养生产次生物质的最新研究进展及产业化现状进行简要介绍。 关键词：植物细胞培养；次生物质；研究进展；产业化现状 1．引言 植物组织细胞培养技术是应用生物工程研究成果，在细胞水平上生产植物生物制品的技术。自从TalⅪta M．由紫草细胞培养提取出紫草宁成为第一个植物细胞培养技术商品至今，国内外动、植物细胞大规模培养研究很快遍布各个医药领域。植物的次级代谢产物是药物和一些工业原料的重要资源，其中许多是难以人工合成但具有显著药用或经济价值的特殊物质。该技术尤其适合于资源短缺、采集困难、种植要求高的名贵药材。运用植物细胞培养技术研制与开发现代天然产物是当今国际细胞培养技术产业化的热点问题和主要发展方向之一，也是我国实现中药现代化，开创低成本、高产出、无污染的工业化生产天然植物药的新路子。 　植物次生代谢产物是植物对环境的一种适应，是在长期进化过程中植物与生物和非生物因素相互作用的结果。在对环境胁迫的适应、植物与植物之间的相互竞争和协同进化、植物对昆虫的危害、草食性动物的采食及病原微生物的侵袭等过程的防御中起着重要作用。 　　次生代谢过程被认为是植物在长期进化中对生态环境适应的结果，它在处理植物与生态环境的关系中充当着重要的角色。许多植物在受到病原微生物的侵染后，产生并大量积累次生代谢产物，以增强自身的免疫力和抵抗力。植物次生代谢途径是高度分支的途径，这些途径在植物体内或细胞中并不全部开放，而是定位于某一器官、组织、细胞或细胞器中并受到独立的调控。 　　它们是细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。 4 自1902 年Haberlant 预言高等植物细胞具有全能性以来, 植物细胞培养开始被用于研究植物的生物合成。用细胞悬浮培养来研究植物代谢物的合成和生产, 是50 年代末期才开展起来的工作。1956 年Rout 让和Nickel l首次提出用植物细胞培养技术生产有用的次生物质。steward 和shantzv 1956 年进行胡萝卜根愈伤组织的液体培养, 发现其, 并于1958 年以胡萝卜根的悬浮细胞诱导分化成完整的小植株。日本人借助于他们在发酵技术上的优势, 曾努力把这一技术应用于植物次生代谢物质的商业性生产。182 年, 在日本召开的第五届国际植物组织和细胞培养会议上, 372 篇论文中大约有70 篇是关于植物细胞培养生产次生物质方面的报告, 有几篇是关于它们在商业上应用的可行性研究报告年间用于促进细胞生长和产物形成的方法开始有所进展。1985 年T abata和Fujita 将提高产量的多种方法相结合实现了第一次商业性的植物细胞培养。随后, 人们在植物细胞培养次生代榭物的产生动力学和复抗的累积杖式方面做了大量研究。Heike Dor nen bu g 和Ditrich Knor : 等人在1997 年设计出了适用于植物细胞培的特殊加工方法, 它包括固定化, 体内产物分离提取和连续操作。目前, 植物细胞培养生产植物次生代谢产物已发展到全自动控制的大容积发酵罐大规模工业生产的连续培养。 植物细胞培养始于本世纪初, 并不可争议地具有工业化潜力。目前植物细胞培养生产的化合物很多, 包括糖类、酚类、脂类、蛋白质、核酸以及帖类和生物碱等初生和次生代谢产物, 植物细胞培养的应用主要包括以下3个方面: 有用物质(次生代谢产物)的生产;植物无性系的快速繁殖和遗传突变体的筛选; 植物细胞遗传、生理、生化和病毒方面的深入研究。但是由于植物细胞大规模培养技术的局限性使得植物细胞仍难以实现大规模工业化生产, 迫切需要进一步研究和发展细胞培养条件的优化控制及其工艺。目前, 世界上众多研究工作集中在优化细胞培养环境、改变细胞特性、选用高产细胞系、改善生物反应器、提高目标产物的产率并保证其生产稳定性上。 4.1、植物细胞培养的特性 （1）植物细胞较微生物细胞大得多，有纤维素细胞壁．细胞耐拉不耐扭，抵抗剪切力差； （2）培养过程生长速度缓慢，易受微生物污染，需用抗生素； （3）细胞生长的中期及对数期．易凝聚为直径达350JJm一400Pm的团块，悬浮培养较难； （4）培养时需供氧，培养液粘度大： （5）具有群体效应； （6） 因为有细胞壁, 培养细胞产物滞留于细胞内，产量较低； （7）细胞培养过程有结构与功能全能性,因而易分化,从而导致目的产物低于原植物体内浓度； （8） 悬浮培养中要求有一定的细胞浓度，否则不生长（25000~50000个/ML）。 , 利用植物细胞培养技术生产次生代谢产物的研究取得了飞