一种新斑马鱼cloche突变体亚型基因鉴定.PDF

· 458 · %%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%% 南方医科大学学报(J%South%Med%Univ)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%2010;30(3) 一种新的斑马鱼cloche 突变体亚型的基因鉴定 1 1 1 2 1 1 1 2 马 宁 ，霍中军 ，颜广 ，黄红辉 ，罗深秋 ，张文清 （南方医科大学 细胞生物学教研室， 遗传学教研室，广东 广州 510515 ） 摘要： 目的斑马鱼 172 突变体的基因鉴定。 方法 采用化学诱变剂 乙基 亚硝基脲（ ， cloche N- -N- N-ethyl-N-nitrosourea ENU ）诱变雄性野生型AB 斑马鱼，实施大规模正向遗传学方法筛选髓系细胞标记物lysozyme C （lyC ）表达缺失突变体， 并对其中一个名为cloche172 突变体进行大体形态学观察，基因定位克隆和遗传学互补实验。 结果大规模正向遗传学筛 选出 个 表达缺失突变体，其中一个 172 突变体受精后 （ ）时期大体形态改变与已知 4 lyc cloche 3%d day%post%fertilization,%dpf 但基因不明的 突变体相似。 遗传学互补实验观察到有 胚胎出现类似 突变体的表型。 同时， 172 突 cloche 1/4 cloche cloche 变体基因定位在 13 号染色体近端粒的区域，与cloche 突变体基因定位区域一致。 而o-dianisdine 实验证实cloche 172 突 变体有较多红细胞聚集， 突变体仅有少量在尾部存在。 结论 172 基因与 基因定位一致， 172 突变 cloche cloche cloche cloche 体是一个新的点突变位点的cloche 突变体。 关键词：斑马鱼 诱变；大规模 缺失突变体筛选； 172 突变体；造血过程 ENU lyC cloche 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： Q812 A 1673-4254(2010)03-0458-05 Positional cloning of a novel allele of zebrafish cloche mutant