研究菌体的培养规律、外界控制因素对过程影响和如何优化.ppt

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发酵过程中的代谢变化与控制参数 温度对发酵的影响及其控制 pH值对发酵的影响及其控制 溶解氧对发酵的影响及其控制 菌体浓度与基质对发酵的影响及其控制 CO2和呼吸商 补料的控制 泡沫对发酵的影响及其控制 工业发酵中往往要接入处于对数生长期的菌体,以尽量缩短适应期。 基质浓度的变化一般随发酵时间的延长而不断下降。 溶解氧浓度亦随发酵过程的变化而发生变化 初级代谢产物由于没有明显的产物形成期,所以它是随菌体生长在不断地形成。 次级代谢产物包括大多数的抗生素、生物碱和微生物毒素等物质。属非偶联型,次级代谢产物的变化一般分为: 此时,碳源、氮源和磷酸盐等的浓度必须控制在一定范围内,并严格控制发酵条件。 pH值:发酵液的pH只是发酵过程中各种生化反应的综合结果,它的高低与菌体生长和产物合成有着重要关系。 温度:它的高低与发酵液中的酶反应速度、氧在培养液中的溶解度和传递速率、菌体生长速率和产物合成速率密切相关。 空气流量:每分钟内每单位体积发酵液通入空气的体积。一般控制在0.5~1.0(L·min) 罐内维持正压,以保证纯种培养,间接影响菌体代谢。一般维持在0.2~0.5×105Pa 在发酵的不同阶段控制不同的转数,以调节培养基中的溶氧。它的大小与氧在发酵液中的传递速率和发酵液的均匀性有关。 搅拌功率、粘度、浊度、料液流量、产物浓度、氧化还原电位、废气中的氧含量、废气中CO2含量、菌体浓度等。 温度对发酵的影响 影响发酵温度变化的因素 温度的控制 温度的变化会影响酶反应的速率,改变菌体代谢产的合成方向,影响微生物的代谢调控机制,影响发酵液的理化性质,进而影响发酵的动力学特性和产物的合成。 Q发酵=Q生物 +Q搅拌 –Q蒸发 –Q显 –Q辐射 Q生物:产生菌在生长繁殖过程中产生的热能。 生物热的大小,随菌种和培养基的不同而变化。一般而言,同一菌种,在同一条件下,培养基成分越丰富,营养被利用的速度越快,产生的生物热就越大。 生物热的大小随培养时间的不同而不同。 生物热的大小与菌体的呼吸强度有对应关系,呼吸强度越大,所产生的生物热也越大 Q蒸发:空气进入发酵罐与发酵液广泛接触后,排出引起水分蒸发所需要的热能 最适温度的选择:最适发酵温度随着微生物菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段的不同而不同。 在菌体的生长阶段,应选择最适生长温度;在产物分泌阶段,应选择最适生产温度。 温度的控制:工业生产上通常将冷却水(或冷媒)通入发酵罐夹层或蛇形管中,通过热交换来降温,以维持最适温度。 pH值对发酵的影响 发酵过程中pH值的变化 发酵pH制的确定及控制 影响酶的活性 H+或OH-在细胞内改变了胞内原有的中性状态,影响到酶蛋白的解离度和电荷情况,从而改变酶的结构和功能。 影响微生物原生质膜所带电荷的状态。 影响培养基中某些组分的解离,进而影响到微生物对这些成分的吸收 不同的pH值,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。 pH值对产物的稳定性也有影响 发酵过程中,pH值的变化,取决于所使用的菌种、培养基成分和培养条件。 发酵过程中,随着微生物对培养基中营养物质的利用及某些物质的积累,发酵液的pH值会发生一定的变化。 微生物的自溶,引起发酵液中氨基酸等的增加,会使pH值增加 发酵所用的碳源种类不同,pH值变化也不一样。 凡是发酵过程中,碱性物质的消耗和酸性物质的生成或释放都会引起发酵液中pH值下降。 引起pH值下降的主要原因 培养基中C/N比例不当,碳源过多,尤其是葡萄糖或中间补糖过多,加之溶解氧不足,致使大量有机酸积累,引起pH值下降 消泡油加得过多。 生理酸性物质的存在,氨被利用,使pH值下降。 引起发酵液pH值上升的主要原因 C/N比例不当,氮源过多,氨基氮释放,使pH值上升 生理碱性物质的存在。 中间补料中氨水或尿素等碱性物质的加入过多,使pH值上升 发酵pH值的确定 发酵pH值的控制 微生物发酵的pH值随菌种和产品的不同而不同 同一菌种,其生长得最适pH值可能与产物合成的最适pH值是不一样的 发酵过程中,应根据不同阶段分别控制pH值 最适pH值可根据实验确定 在确定发酵适宜的pH值时,应考虑培养温度对它的影响 菌体的比生长速率与产物的比生产速率的最适pH都在一个相似的较宽的适宜范围内 OP(或μ)的最适pH值范围很窄,而μ(或QP)的范围较宽 μ或QP对pH值都很敏感,他们的最适pH值又是相同的 μ和QP有各自的最适pH值 pH值调节、控制的主要方法 选择合适的培养基,调节培养基原始的pH值。在分批发酵中常用CaCO3作为缓冲剂来控制pH值的变化 可在发酵过程中加入弱酸或弱碱进行pH制的调节,如果此法不能改善发酵情况,应采用补料的方法 补料:补加生理酸性物质[如

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