医学分子遗传学第五章基因表达调控.pptx

第五章 基因表达调控;RNA与转录调控 真核生物的RNA种类与不同的RNA聚合酶 活性染色质结构是基因转录的前提 转录过程与调控 起始 延伸 终止 转录后水平的调控 RNA的剪接与加工 RNA的转运;基因表达（gene expression）;RNA与转录调控;结构性RNA（占细胞总RNA的95%） 核糖体RNA（Ribosomal RNA，rRNA） 转运RNA（transfer RNA，tRNA） 核小RNA （small nuclear RNA，snRNA） 核仁小RNA （small nucleolar RNA，snoRNA） 功能性RNA（不均一RNA，占细胞总RNA的5% ） 信使RNA（messenger RNA，mRNA）及其前体 非编码RNA（non-coding RNA）及其前体 microRNA lncRNA （long non-coding RNA）;Ribosomal RNA（rRNA） 组成核糖体核酸组分 真核生物包括28S、18S、5.8S（以前体形式转录为45S RNA，经剪接加工后产生）和5S rRNA 存在多种碱基修饰 提供核糖体骨架和催化活性位点 占细胞RNA总量的80% ;transfer RNA（tRNA） 大小：70～90nt，存在多种碱基修饰 种类：约80种，约占细胞RNA总量的15% 结构 二级结构——三叶草，“三环一臂”（D环、TψC环、反密码子环、（额外环）、氨基酸臂—3‘末端 CCA+Amino acid） 三维结构——“L”型 功能：运载氨基酸至核糖体进行蛋白合成;核小RNA（small nuclear RNA，snRNA） 以核糖核蛋白颗粒（snRNP）形式存在于细胞核内 包含U1、U2、U4、U5、U6成员 功能：与蛋白结合形成剪接体（spliceosome），参与mRNA前体的剪接（splicing） ;核仁小RNA（small nucleolar RNA，snoRNA） 独立转录或来源于其他转录基因的内含子 包括H/ACA型和C/D型两种主要类型，共约40种 参与rRNA的剪切、加工（碱基修饰）与核糖体的组装;信使RNA（messenger RNA，mRNA）——遗传信息的传递者（编码蛋白产物） 成熟mRNA 5’端具有帽子结构 3’ 端有polyA尾巴 mRNA中包含蛋白读码框 （open reading frame，ORF /coding sequence，cds） 非编码RNA（non-coding RNA） ——无蛋白读码框 ;microRNA;长非编码RNA （long non-coding RNA， lncRNA） 长度200bp ，无读码框，属不均一RNA 预测占基因组4%～9% 转录形式（来源）多样：正向、反向、双向、内含子中、基因间…… 功能多样 ;RNA是由RNA聚合酶（RNA polymerase）催化合成的。 以DNA为模板合成RNA的过程称为转录（transcription） 真核生物含有三种RNA聚合酶 RNA polymeraseⅠ——转录45S rRNA前体（结构性RNA） RNA polymeraseⅡ——转录mRNA、pri-microRNA、lncRNA（不均一RNA，功能性RNA），snRNA（U1~U5）、snoRNA RNA polymeraseⅢ——转录tRNA、5S rRNA、snRNA（U6）、少部分microRNA（小RNA，结构性RNA） 每种RNA聚合酶都包含多个亚基（～12个），聚合体总分子量超过500kDa。;Example：Structure of RNA polymeraseⅡ;启动RNA转录的必要条件 染色质重构产生活性染色质结构 反式作用因子（转录因子、辅激活子）识别并结合启动子/增强子上的顺式作用元件 募集特定RNA聚合酶到转录起始点 转录过程 起始（initiation） 延伸（elongation） 终止（termination） RNA转录后需进行加工与转运;启动RNA转录前需克服染色质的表观修饰障碍 ;发生在转录起始前调控——染色质重构（chromatin remodeling） BRG1-Swi/SNF complex 结合于染色质特定位点（具 有基因与DNA序列特异性） BRG1-Swi/SNF complex 引发核心组蛋白相对DNA 的滑动或解离（被置换） 一段含有特定序列（顺式作 用元件）的游离双链DNA 被暴露，被特异性转录调控 复合物识别结合，启动转录 ;启动子与增强子包含顺式作用元件 顺式作用元件（cis-acting element）：位于基因的旁侧，可以调控基因表达的核酸序列。 启动子（promoter）：位于转录起始点附近（通常位于起始点上游200bp的范围内）