生物细胞光学非线性成像技术研究.pdfVIP

摘 要 Photon 双光子荧光(Two 特点，二次谐波(SecondHarmonic 伤小，时间空间分辨率高以及对结构的对称性敏感等特性，阕此舣光子荧光成像桐I二次谐波 成像成为近年米生物成像领域的研究热点。． 本论文首先舟缓了砹光子荧光拳l二次谐波的基本原理，综述了这瑟种成像方法酶特煮及 其钕细胞成像中的应用。 在此基础上，论文闱绕上述两种方法进行了以”F的研究：r作： 在双光子荧光成像方嚣，我们采磺自行合成豹苯乙烯基难乏啶盐衍生物染料作为荧光标记， 基予荧光共焦显微镜获得了高信嗓眈的般光予荧光成像。论文对染料溶液浓度、标记时闻等 影响荧光成像的因素进行了讨论。此外，对染料的生物相容性，抗光漂向等特性进行了研究。 结卷表明，该类染料生物毒性小，标记细臌间细丝的能力较强，适合于K时间的细胞成像观 测。最磊对鲡褥提高荧光成像的效采进行了展望。 在二次谐波方面，首先概述了基于染料标记的二二次谐波细胞成像技术，特别是利用电压 敏感染料，手性材料和金属纳米j}iI子作为标记的儿种SHG细胞成像技术。实验上，本论文研 究了金属纳米粒子的二次谐波特性，势探测到了基于金属纳米粒子聚集效应的二次谐波增强 特憔。另一方面，对银胶和染料苯乙烯基毗啶盐衍生物的复台体系的二次谐波信譬进行了测 量，获得了明显增强的二次谐波信号。讨论了影响增强因子的因素，包括银纳米粒子与染料 的混合比例、激发波＆等。初步探讨了增强的机制。最磊展望了该技术在生物成像领域的应 用前景。 关键词：双光子荧光，二次谐波，细胞成像，标记，增强 Abstract the as has Two—photonfluorescence(TPF)imagingadvantageslargepenetration and lOW whilesecondharmonic depth．highsignal．tO．noisephotodamage generation hasthe of and advantages (SHG)imaging largepenetrationdepth，highspatial temporal resolution．10W and tothe ofthe photodamageespecially,sensitivitysymmetrychange microstructure．Becauseof these andSHG both advantages．TPFimagingtechnique have to hot becomebethe ifl research．Here．wediscussedtheabove topicsbio—imaging two methodsandtheir in powerfulimaging applicationsbiophotonics． cinamic ramificationasfluorescence Using pyridine dyes label．highsignal．to．noise TPF we