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第三节 核酸的理化性质 和研究方法 College of Life Sciences, CNU 一、核酸的一般性质 1. 状态：  核苷酸为无色晶体或粉末,  DNA为白色纤维状固体，  RNA为白色粉末。 2. 分子大小：  核苷酸分子量：1个脱氧核苷酸对 618D.  DNA和RNA 皆是高分子量物质。 College of Life Sciences, CNU 3. 粘度： DNA分子粘度要比RNA大得多。 粘度大小：线性分子 不规则线团 球形分子  变性DNA粘度下降。 4. 溶解性：  核苷酸易溶于水，DNA 、RNA微溶于水，皆不溶 于有机溶剂。  核酸钠盐比游离酸易溶于水。 College of Life Sciences, CNU 5. 特殊颜色反应  核酸的溴化乙锭（EB ）染色 EB是一种荧光染料，可插入核酸相邻碱基对之间。 在紫外灯下，结合EB的核酸呈橙红色荧光。灵敏度 为10ng。 College of Life Sciences, CNU GELred 染色 Gelred是由美国Biotium公司研 发的高灵敏、高稳定、低毒性 的荧光核酸凝胶染色试剂。 Gelred染色原理同EB ，是一种 DNA插入式染料，但是它同时 解决了EB本身存在的缺陷，例 如高诱变性和高背景信号等。 College of Life Sciences, CNU 6. 旋光性  核酸分子是高度不对称的，具旋光性。 DNA的比旋值[]D = + 150° （右旋）  核酸变性，比旋值下降。 7. 紫外吸收 嘌呤碱、嘧啶碱存在共轭双键，所以碱基、核苷、 核苷酸、核酸在240-290nm处有强烈的紫外吸收，最 大吸收峰在260nm处。 College of Life Sciences, CNU pH 7.0 下核苷酸的吸收光谱和摩尔消光系数 252nm 259nm 267nm 262nm 271nm College of Life Sciences, CNU 应用： （1 ）定性定量鉴定各种核苷酸 （2 ）核酸纯度鉴定 纯DNA: A260 / A280 1.8 纯RNA: A260 / A280 = 2.0 （3 ）核酸纯品定量鉴定 A260 =1, 相当于 50g / ml 双螺旋DNA 40g / ml 单链DNA （RNA ） 20g / ml 寡核苷酸 College of Life Sciences, CNU 二、核酸的水解 1. 酸水解 糖苷键和磷酸酯键皆可以被酸水解。 稀盐酸 可水解