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淋巴细胞亚群及相关项目的临床意义 安徽省立儿童医院 2013.8.5 主要内容 1.淋巴细胞亚群及相关项目的基本介绍 2.流式细胞仪的工作原理 3.淋巴细胞亚群及相关项目的临床意义 4.结论 2.流式细胞仪的工作原理 2.1发展简史 1934年，Moldvan最先构建了该仪器雏形 1949年，Culter申请“流动的悬浮粒子计数”专利，即著 名的Culter原理 1969年，Van.Dilla研制出现代意义的流式细胞仪 1972年，流式细胞仪商品化时代的到来 2.2工作原理 采用激光作为激发光源，保证其具有很好的单色性与激发效率 利用荧光染料与单克隆抗体结合的标记技术，保证检测的灵敏度和特异性 利用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号，进行数据处理，保证检测速度与统计分析精确性 2.3实际应用 淋巴细胞及亚群分析 淋巴细胞功能分析 白血病免疫分型 肿瘤耐药相关蛋白分析 艾滋病检测 自身免疫性疾病相关人类白细胞抗原分析 抑制免疫中的应用 3.临床意义 3.1淋巴细胞亚群 T细胞亚群： CD3 ：传单，肝炎活动期；CD3 ：恶性肿瘤，化疗后 ，自身免疫病，较严重的全身感染。 CD4 :川崎；CD4 ：病毒感染（传单，手足口，CMV、HIV感染等），粒细胞减少，白血病。 CD8：在免疫功能无缺陷的情况下，基本上是增高的，但在白血病的情况下，基本没有。 NK细胞：在病毒感染早期及长期使用干扰素时，可增高；较严重的感染、恶性肿瘤会大幅度降低，作为嗜血细胞综合症的诊断指标之一，连续监测以观察疗效。 B淋巴细胞：细菌性感染（常伴CD64增高）、 ITP，可增高，可能是ITP患儿抗血小板抗体产生的直接根源，并作为免疫抑制剂是否继续使用的依据；无丙种球蛋白血症、嗜血、传单，可降低，为治疗时使用丙种球蛋白提供依据。 3.2其他相关项目 CD64：特异性针对细菌感染，在非感染性炎症和病毒感染时均不会升高，并可在外周血中早期检测。重症医学科、外科、血液科、新生儿科观察患儿的感染程度并进行监测的首选指标。 4.结论 淋巴细胞亚群及相关项目的开展，提升并扩展了目前的检验项目，并为下一步白血病免疫分型的开展搭建了技术平台。 谢谢大家！ * * CD64（中性粒细胞感染指数）：正常情况下外周血低水平表达，当机体受到细菌感染时，会特异性的快速升高，是细菌感染早期检测指标 NK细胞:CD3-CD16+CD56+，是机体固有免疫的重要细胞成分 CD19+CD23+ ：炎症前因子，在介导过敏反应中起重要作用 B淋巴细胞：CD3-CD19+,执行细胞体液免疫 CD4+CD25+：调节性T细胞，主要起抑制性免疫调节作用 T淋巴细胞：CD3+，CD3+CD4+(辅助性T细胞）CD3+CD8+(杀伤性T细胞） 其他相关项目 淋巴细胞亚群 1.1淋巴细胞亚群及相关项目的基本介绍 抗原（细胞膜上的CD分子）+抗体（带有特定荧光染料的单克隆抗体） 激光（488nm氩离子冷激光） 抗原抗体复合物 光电倍增管进行光电转换和信号放大 电脉冲信号 荧光信号 计算机结果分析 检测结果