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专题3 植物的组织培养技术 3.1 菊花的组织培养(预)
【学习目标
1.植物组织培养的基本原理。
2.植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
【知识梳理】
一、基础知识
(一)植物的组织培养的基本过程
1.植物组织培养的原理
(1)细胞分化:个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
根本原因:在特定的时间和空间条件下,基因的选择性表达。
(2)细胞全能性:生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。
植物细胞表现全能性条件:离体、营养物质、激素和其他外界条件。
2.植物组织培养的基本过程
试管苗
脱分化(去分化):高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。
愈伤组织:通过细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则,高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。
再分化:愈伤组织继续进行培养重新分化成根或芽等器官的过程。
(二)影响植物组织培养的因素
1.外植体的选取
① 不同植物的组织培养难度
一般选择植物的幼嫩部分(生命力旺盛,分裂分化能力强;含有的病毒少),比如茎尖、根尖、幼嫩的叶片等;
保存时间越短,材料生命力越旺盛;保存时间越长,越容易受到污染。
例如:菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
2.培养基的配制(MS培养基)
MS培养基主要成分
大量元素:N、P、K、Ca、Mg、S ;
微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、C;
有机物:甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等;
植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等。
3.不同植物激素浓度、使用顺序和使用量
用量比例与根、芽的分化
生长素和细胞分裂素比值 结果 比值高时 促进根的分化,抑制芽的形成 比值低时 促进芽的分化,抑制根的形成 比值适中 促进愈伤组织的形成
pH、温度、光照等条件也很重要。例如菊花组织培养的条件:pH=5.8 、温度、控制在18—22℃、每日光照12h。
二、实验操作
(一) 制备MS培养基
1.配制各种母液
2.配置培养基
菊花的茎段的组织培养比较容易,不必添加植物激素。
3.灭菌
(二)外植体消毒
(三)接种
1.接种室消毒
2.无菌操作
在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。
3.材料的切取和接种
(四)培养
(五)移栽
【课前热身】
1.判断下列说法的正误
(1)二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后可得到稳定遗传的植株( × )
(2)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是植物组织培养( √ )
(3)脱分化过程不需要植物激素,植物激素只有在再分化过程中发挥作用( × )
(4)由于植物细胞都具有全能性,所以菊花的组织培养实验中选材不会影响实验的结果( × )
(5)制备好的MS培养基用于植物组织培养时,需要加入植物激素( √ )
(6)被子植物的花粉发育要经过小孢子四分体时期、双核期和单核期等阶段( × )
(7)单倍体植株的形成有两种途径,两种途径主要取决于培养基中植物激素的种类及其浓度配比( √ )
(8)如果通过植物组织培养从愈伤组织中提取某种成分,应先使用生长素后使用细胞分裂素( √ )
下列有关植物组织培养技术的叙述,正确的是( )
A.经脱分化和再分化过程形成的幼芽细胞不具有细胞全能性
B.在愈伤组织培养过程中加入聚乙二醇,可获得染色体加倍的细胞
C.利用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁有利于脱分化的发生
D.培养基中生长素和细胞分裂素的比例将影响愈伤组织分化的方向
答案D
1
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