鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达与多克隆抗体制备.pdfVIP

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2017-06-04 发布于北京
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鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达与多克隆抗体制备.pdf

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农业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2003,11 4 冤院 4 12~4 16 ·研究论文· 鸡白介素-2 因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备* 2 1 1 3 2 萨仁高娃刘胜旺 ** 孔宪刚丁忠庆乌尼 (1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨 150001 ；2. 内蒙古农业大学动物科学与医学学院, 呼和浩特 010018；3. 东北农业大学动物医学院, 哈尔滨 150030 ）：（（摘要编码鸡）白细胞介素-2 （interleukin-2,IL-2 ）蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌）原核 TM 表达载体pPROEX HT 中，构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后重组质粒转化大肠杆菌DH5 并用IPTG 于37 。表达的鸡诱导培养 SDS和Western blot 分析显示， IL-2 融合蛋白分子量约为19 kD 。融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%。包涵体被6 mol/L 盐酸胍裂解后，通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-2 融合蛋白及其纯化产物免疫家兔，制备兔抗鸡IL-2 多克隆抗血清，并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定，表明其与纯化的重组鸡IL-2 蛋白具有良好的反应性，而且该反应是特异的。：；抗体制备关键词鸡IL-2 融合蛋白；表达 Expression of Recombinant Chicken Gene in and Preparation of Antibody against Recombinant Chicken IL-2 protein 2 1 1 3 2 Sa-Ren Gaowa Liu Shengwang ** Kong Xiangang Ding Zhongqing Wu Ni (1. National Laboratory of Veterinary Biotechnology, Institute of Harbin Veterinary Medicine ，Chinese Academy of Agricultural ScienceS, Harbin 150001, China; 2 . College of