18基因表达调控精选.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * 常结合CAAT盒 3.碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper, Bzip) （a）碱性亮氨酸拉链模体结构示意图；（b）bZIP模体与DNA结合的示意图。两个?-螺旋上的亮氨酸残基彼此接近，形成了类似拉链的结构，而富含碱性氨基酸残基的区域与DNA骨架上的磷酸基团结合 五、转录起始复合物的动态构成是转录调控的主要方式 （一）启动序列/启动子与RNA聚合酶活性 （二）调节蛋白与RNA聚合酶活性 启动序列或启动子的核苷酸序列会影响其与RNA聚合酶的亲和力，而亲和力大小则直接影响转录起始的频率 真核RNA聚合酶II不能单独识别、结合启动子，而是先由基本转录因子与RNA聚合酶II形成一个功能性的转录前起始复合物。 图18-12 转录起始复合物的形成 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成转录起始复合物。 PolⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP DNA TATA EBP TBP 六、转录后调控主要影响真核mRNA的结构与功能 （一）mRNA稳定性的影响真核生物基因表达 5?-端的帽子结构可以增加mRNA的稳定性 3?-端的poly(A)尾结构防止mRNA降解 RNA无论是在核内进行加工、由胞核运至胞浆，还是在胞浆内停留（至降解），都是通过与蛋白质结合形成核蛋白颗粒(ribonucleoprotein, RNP)进行的。 与原核基因表达调节一样，某些小分子RNA也可调节真核基因表达。 这些RNA都是非编码RNA（noncoding RNA, ncRNA）。如：具有催化活性的RNA（核酶）、细胞核小分子RNA （snRNA）以及核仁小分子RNA（snoRNA） 目前人们广泛关注的非编码RNA有miRNA和siRNA。 小分子RNA对基因表达的调节十分复杂， （二）一些非编码小分子RNA可引起转录后基因沉默 （三）mRNA前体的选择性剪接可以调节真核生物基因表达 真核生物基因所转录出的mRNA前体含有交替连接的内含子和外显子。通常状态下，mRNA前体经过剔除内含子序列后成为一个成熟的mRNA，并被翻译成为一条相应的多肽链。但是，参与拼接的外显子可以不按照其在基因组内的线性分布次序拼接，内含子也可以不完全被切除，由此产生了选择性剪接 七、真核基因表达在翻译以及翻译后仍可受到调控 （一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行 蛋白质合成速率的快速变化在很大程度上取决于起始水平，通过磷酸化调节翻译起始因子（eukaryotic initiation factor, eIF）的活性对起始阶段有重要的控制作用。 1．翻译起始因子eIF-2α的磷酸化抑制翻译起始 2．eIF-4E及eIF-4E结合蛋白的磷酸化激活翻译起始 帽结合蛋白eIF-4E与mRNA帽结构的结合是翻译起始的限速步骤，磷酸化修饰及与抑制物蛋白的结合均可调节eIF-4E的活性。 磷酸化的eIF-4E与帽结构的结合力是非磷酸化 的eIF-4E的4倍，因而可提高翻译的效率。 （二）RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节 RNA结合蛋白（RNA binding protein, RBP），是指那些能够与RNA特异序列结合的蛋白质。 基因表达的许多调节环节都有RBP的参与，如前述转录终止、RNA剪接、RNA转运、RNA胞浆内稳定性控制以及翻译起始等。 （三）对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达 新合成蛋白质的半衰期长短是决定蛋白质生物学功能的重要影响因素。因此，通过对新生肽链的水解和运输，可以控制蛋白质的浓度在特定的部位或亚细胞器保持在合适的水平。 许多蛋白质需要在合成后经过特定的修饰才具有功能活性。通过对蛋白质的可逆的磷酸化、甲基化、酰基化修饰，可以达到调节蛋白质功能的作用，是基因表达的快速调节方式。 是一大家族小分子非编码单链RNA，长度约20-25个碱基，由一段具有发夹环结构，长度为70~90个碱基的单链RNA 前体(pre-miRNA)经Dicer酶剪切后形成。 这些成熟的miRNA 与其他蛋白质一起组成RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex, RISC），通过与其靶mRNA 分子的3 端非翻译区域（3 UTR）互补匹配，再以目前尚不清楚的机制抑制该mRNA 分子的翻译。 （四）小分子RNA对基因表达的调节十分复杂 1．微小RNA (microRNA, miRNA) 其长度一般为20~25个碱基； 在不同生物体中普遍存在； 其序列在不同生物中具有一定的保守性； 具有明显的表达阶段特异性和组织特异性； miRNA 基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，