实验-植物DNA提取及检测-cc剖析.ppt

DNA分子量标准 1.凝胶制备 制备1%琼脂糖凝胶。称取0.8g琼脂糖加入 80mL 1×TAE，加热至琼脂糖全部熔化，冷却至50-60℃ 时,缓慢倒入胶板，迅速加入 EB 8μl，混匀，排气泡，插上梳子，待胶凝固后拔出。 2.加样 取4μl DNA样液与 2μl 上样 buffeer 混匀，用微量移液器小心加入样品槽。 3.电泳 接通电源，切记靠近加样孔的一端为负，电压为1~5V/cm（长度以两个电极之间的距离计算）,待溴酚兰移动到一定位置，停止电泳。 4.观察拍照 四、操作步骤 * 植物总DNA的提取 主讲人：陈晨 植物基因组DNA的提取 一 、实验目的 学习并掌握植物基因组DNA的提取原理和方法 脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA) 与蛋白质结合在一起以核蛋白（DNP）的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。 植物总DNA包括细胞核DNA和细胞核外DNA,前者存在于细胞核内，后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内，例如线粒体DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。 二、实验原理 细胞破碎 抽提去蛋白质 沉淀核酸 基本过程 ①机械方法： 超声波处理法、研磨法、匀浆法； ②化学试剂法：用SDS处理细胞； ③酶解法： 加入溶菌酶或蜗牛酶，破坏细胞壁。 细胞破