第九章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定.pptx

;第九章 革兰阳性需氧 和兼性厌氧杆菌鉴定;本 章 内 容;学习目标及重点;第一节 革兰阳性无芽胞杆菌;一、白喉棒状杆菌 （一）生物学特性 1.形态与染色：G+，菌体细长弯曲 ，栅栏状，异染颗粒 2.培养特性 含有凝固血清的吕氏培养基（Loeffler medium）：细小、灰白色湿润、圆形突起的菌落 含有亚碲酸钾血琼脂平板：黑色菌落;一、白喉棒状杆菌 3.变异： 白喉棒状杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异 4.生化反应 ;一、白喉棒状杆菌 (二) 微生物学检验 1. 检验程序;一、白喉棒状杆菌 2. 标本：咽拭子取分泌物。不能及时检验时，可将标本浸于生理盐水或15％甘油盐水中保存 3.鉴定 （1）标本直接涂片 革兰染色：观察形态、染色性 异染颗粒染色：观察异染颗粒 （2）分离培养 吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板：黑色菌落;一、白喉棒状杆菌 （3）毒力测定 1）体外法：可用Elek’s琼脂扩散法、SPA协同凝集、对流电泳等检测外毒素 2）体内法：用实验动物(豚鼠、家兔)体内毒力测定（毒素－抗毒素中和试验） ;一、白喉棒状杆菌 (三) 临床意义 1. 致病因子：外毒素 2. 所致疾病：白喉，急性呼吸道传染病，乙类传染病;二、产单核李斯特菌 李斯特菌属包括 产单核李斯特菌(L.monocytogenes) 此菌对人致病 绵羊李斯特菌(L.ivanovii) 英诺克李斯特菌(L.innocua) 威尔斯李斯特菌(L.welshimeri) 西尔李斯特菌(L.seeligeri) 格氏李斯特菌(L.grayi) 默氏李斯特菌(L.murrayi) ;二、产单核李斯特菌 (一) 生物学特性 1.形态与染色 G+球杆菌, 20～25℃形成周鞭毛，37℃时鞭毛很少或无；无芽胞 2.培养特性 兼性厌氧菌、3～45℃均能生长（4℃冷增菌），最适30～37℃ 营养要求不高，在含血液、血清、腹水的培养基生长更好。耐盐（200g/LNaCl）。 血琼脂平板：形成较小、圆形、光滑而有狭窄β溶血环的菌落 ;二、产单核李斯特菌 3. 生化反应：触酶试验（+）、氧化酶（-）、CAMP（+）、葡萄糖（+） 、麦芽糖（+） 、果糖（+）；VP （+）、MR （+）、七叶苷（+） 4.抵抗力：耐盐、耐碱、、耐冷、不耐酸；对氨苄青霉素，青霉素、链霉素、红霉素等敏感，对杆菌肽、多黏菌素耐药;二、产单核李斯特菌 (二)微生物学检验 1.标本：血液、脑脊液、分泌物及病变组织 2.染色：G+球杆菌（细胞内、外） 3.分离培养：血液琼脂、5%-10%CO2 、35℃ 4 .诊断要点：G+球杆菌、（湿片）翻筋斗样运动、触酶阳性、七叶苷阳性、葡萄糖（+）、MR （+）、 VP（+）;二、产单核李斯特菌 (三) 临床意义 1.传播途径：粪-口传播；垂直感染 2.致病物质：溶血素O、磷脂酰肌醇-特异性磷脂酶C（PI-PLC） 3.所致疾病：可引起食物中毒，病死率高达30％— 70％ 该病的临床表现，健康成人个体出现轻微类似流感症状，新生儿、孕妇、免疫缺陷患者表现为呼吸急促、呕吐、出血性皮疹、化脓性结膜炎、发热、抽搐、昏迷、自然流产、脑膜炎、败血症直至死亡 ;三、红斑丹毒丝菌 丹毒丝菌属——代表菌种 红斑丹毒丝菌(E. rhusiopathiae 产单核丹毒丝菌（E. monocytogenes） 扁桃体丹毒丝菌（E. tonsillarum） 1.形态与染色：革兰阳性短小杆菌，无鞭毛，无芽胞，无荚膜 2.培养：厌氧或微需氧，血平板上形成两种菌落：S菌落：细小、圆形、凸起有光泽（较小，毒力强）；R菌落：较大，颗粒状、扁平、边缘不齐（较大，毒力弱） ;三、红斑丹毒丝菌 3.生化反应 触酶阴性；分解乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖 三糖铁培养基上产H2S（突出特点） 4.鉴定：通过形态染色、生化反应，特别是TSI上产生H2S，可初步鉴定是红斑丹毒丝菌，但要与产单核李斯特菌鉴别 5.临床意义：红丹毒丝菌病是一种急性传染病，主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类，人类也因接触引起感染。也可引起败血症和心内膜炎。近年在发达国家因污染奶制品而引起食物中毒。青霉素是治疗该病的首选抗菌药物;芽胞杆菌属（Bacillus）中5种与医学相关 炭疽芽胞杆菌（B. anthracis） 蜡样芽胞杆菌(B. cereus) 蕈状芽胞杆菌(B. mycoides) 巨大芽胞杆菌(B. megaterium) 苏云金芽胞杆菌(B. thuringiensis) ;一、炭疽芽胞杆菌 (一) 生物学特性 1.形态与染色 致病菌中最大的G+粗大杆菌，两端平切、排列呈竹节状、有荚膜，无鞭毛 芽胞在有氧条件下形成，呈椭圆形，位于菌体中央（抵抗力强）