2016新课标三维人教生物选修1 专题五 课题3 血红蛋白的提取与分离.docVIP

课题3血红蛋白的提取和分离 1．凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法，相对分 子质量大的先洗脱出来，相对分子质量小的后洗脱出来。 2．在电泳中，待分离样品中分子带电性质的差异以及分子本身的大小、 形状都会影响分子的迁移速度。 3．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移率完全取决于分子的大小。 4．蛋白质提取和分离的一般步骤是：样品处理及粗分离、纯化和纯度鉴定。 5．透析法可除去相对分子质量较小的杂质。 6．在对蛋白质进行纯度鉴定时，使用最多的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳。 一、蛋白质分离的原理和方法 1.分离原理 依据蛋白质各种特性的差异分离蛋白质，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等。 2.凝胶色谱法 (1)概念：也称为分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。 (2)凝胶：微小的多孔球体，大多数由多糖类化合物构成，内部有许多贯穿的通道。 (3)原理：[填表] 蛋白质类型 能否进入凝胶内部 移动路程 移动速度 相对分子质量较小 能 较长 较慢 相对分子质量较大 不能 较短 较快 3．缓冲溶液 (1)作用：在一定范围内，抑制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。 (2)配制：由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，通过调节缓冲剂的使用比例就可以得到不同pH范围内使用的缓冲液。 4．电泳