产肠毒素大肠杆菌987P菌毛fasG亚单位优化表达.pdf

农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2008,16 (4): 687~693  ·研究论文 · 产肠毒素大肠杆菌 987P 菌毛 亚单位 的优化表达 *  ,  ,  ,  ** 罗何峰 王 劼 苟钟勇 彭 健  430070 （华中农业大学动物营养与饲料科学系 ，武汉， ） ： （ BL21(DE3) Rossetta(DE3) 摘要 选用两种对稀有密码子效应不同 的表达宿主菌大肠杆菌 ） 和 ， 和两种不 同 （ pET28a(+) pGEX­KG 4 pET­  BL21(DE3) pET­  Rossetta(DE3) pKG­  BL21  的表达载体 和 ， 构建 出 种重组表达菌 、 、 (DE3) pKG­  Rossetta(DE3) 。 对重组表达菌进行诱导表达的结果表明， 不管是 和 ） 来考查稀有密码子对 基 因表达的影响 pET­ 质粒还是 pKG­ 质粒 ， 目的蛋白在 Rossetta(DE3)中的表达量都要比在 BL21(DE3)中的高。使用补充 了额外 的稀 有密码子 tRNA 的表达菌 Rossetta(DE3)， 提高 了目的蛋白的表达量。 ： ； 关键词 肠毒素大肠杆菌 987P； ； 克隆； 优化表达 中图分类号: S188  文献标识码: A  文章编号: 1006­1304(2008)04­0687­07  OptimizingExpression ofthe Subunit  of987P Fimbriae of  Enterotoxigenic ETEC （ ） LUOHe­feng,WANGJie,GOUZhong­yong,PENGJian**  Four bioengineeredbacteria of  genewere constructed using Two  expression strains (BL21(DE3)  and Rossetta (DE3)) with different tRNA profiles and two  expression vectors (pET28a (+) and pGEX­KG) to examine the  influence of the rare codons on the expression of  gene. The result of inducing expression of the bioengineered bacteria