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微生物的高密度培养 第二节 细菌的群体生长繁殖 二、同步培养 同步培养(Synchronous culture)： 使群体中的细胞处于比较一致的，生长发育均处于同一阶 段上，即大多数细胞能同时进行生长或分裂的培养方法。 以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段，并同时 进行分裂的生长。 同步生长： 通过同步培养方法获得的细胞被称为同步细胞或同步培养物 第二节 细菌的群体生长繁殖 二、同步培养 同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传 特性和作为工业发酵的种子，它是一种理想的材料。 机械方法 离心方法 过滤分离法 硝酸纤维素滤膜法 环境条件控制技术 温度 培养基成份控制 其他（如光照和黑暗交替培养） 第二节 细菌的群体生长繁殖 二、同步培养 硝酸纤维素滤膜法是最经典的获得同步生长的方法 由于细胞的个体差异，同步生长往往只能维持2-3个世代， 随后又逐渐转变为随机生长。 三、连续培养 第二节 细菌的群体生长繁殖 将微生物置于一定容积的培养基中，经过培养生长，最后一次收获。 分批培养（batch culture）or 封闭培养（closed culture） 培养基一次加入，不予补充，不再更换。 连续培养(Continous culture ） 在微生物的整个培养期间，通过一定的方式使微生物能以恒定 的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。 培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 控制连续培养的方法 恒浊连续培养 不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定 恒化连续培养 保持恒定的流速 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 （一）恒浊连续培养 测定所培养微生物的光密度值 自动调节新鲜培养基流入和培养物流出培养室的流速 使培养物维持在某一恒定浊度 当培养室中的浊度超过预期数值时，流速加快，使浊度降低； 当培养室中的浊度低于预期数值时，流速减慢，使浊度升高； 恒浊培养器的工作精度是由光电控制系统的灵敏度来决定的 如果所用培养基中有过量的必需营养物，就可以使菌体维持最高的 生长速率。 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 （一）恒浊连续培养 一般用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵工业 （连续发酵） 连续发酵与单批发酵相比的优点： 缩短发酵周期，提高设备利用率； 便于自动控制； 降低动力消耗及体力劳动强度； 产品质量较稳定； 缺点：杂菌污染和菌种退化 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 二）恒化连续培养 使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高 生长速率下进行生长繁殖。 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 二）恒化连续培养 恒化连续培养中，必需将某种必需的营养物质控制在较低的浓度， 以作为限制性因子，而其他营养物均过量。 （细菌的生长速率取决于限制性因子的浓度，并低于最高生长速率） 限制性因子必须是机体生长所必需的营养物质，如氨基酸和氨等氮 源，或是葡萄糖、麦芽糖等碳源或者是无机盐，因而可在一定浓度 范围内能决定该机体生长速率。 第二节 细菌的群体生长繁殖 三、连续培养 通过控制流速可以得到生长速率不同但密度基本恒定的培养物 多用于科研 遗传学：突变株分离； 生理学：不同条件下的代谢变化； 生态学：模拟自然营养条件建立实验模型； 1.选取最佳培养基成分和各成分含量 2.补料：流加 3.提高溶解氧的浓度：“上氧气”或基因工程vgb基因 4.防止有害代谢产物的合成 * * 第五章 微生物的生长繁殖 及其控制 生物个体物质有规律地、不可逆增加，导致个体 体积扩大的生物学过程。 生长： 生物个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的 生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 繁殖： 生长是一个逐步发生的量变过程， 繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。 在高等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单 细胞的生物里，由于细胞小，这两个过程是紧密联系又很难划 分的过程。 一个微生物细胞 合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢。 如果同化作用的速度超过了异化作用 个体的生长 原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加 如果各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就 会发生繁殖，引起个体数目的增加。 群体内各个个体的进一步生长 群体的生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 个体生长 → 个体繁殖 → 群体生长 在一定时间和条件下细胞数量的增加（微生物群体生长） 微生物生长: 在微生物学中提到的“生长”，一般均指群体生长，这一点与 研究大生物时有所不同