转基因动物应用前景.pdfVIP

转基因动物的应用前景 冯彦东，马小军，李越，马志辉，肖海元，马永刚，马聪 甘肃农业大学动物科学技术学院 甘肃兰州 (730070) 摘 要：本文较为全面的综述了各种转基因动物技术的方法，以及提高转基因效率的方法； 指出了目前研究中存在的问题，并对其发展前景进行了展望。 关键词：转基因动物、基因、方法、应用、前景 科学家预言，21 世纪是生命科学的世纪，生物技术产业已成为科学家和企业家开发的 热点。转基因动物技术是21 世纪发展最为迅速的生物高新技术之一，是建立在细胞遗传学、 分子遗传学、胚胎发育学和DNA重组技术基础之上的生物工程技术。转基因技术就是利用 工程技术的实验手段将特定外源基因导入受体细胞中，由此整合到受体细胞的染色体上，并 使外源基因得到表达和遗传的生物技术。携带外源基因并能表达和遗传的支物称为转基因动 物。转基因技术是新兴的生物技术，具有广阔的应用前景。目前利用转基因技术获得的主要 是粮食作物，其中转基因植物及产品已进入商品化生产阶段。转基因动物的研究尚处于实验 室研究阶段，获得转基因动物技术难度较大。但它是一种通过对基因的操作，在RNA 、蛋 白质、形态学或生理学等水平直接观察基因在活体内的活动情况，并观察其表达产物所引起 的表型效应的四维实验体系，其应用已广泛渗透于分子生物学、发育生物学、免疫学、制药 及畜牧育种等各个研究领域中，既具有深远的理论价值，又有重大的应用价值。据统计，全 球已有以转基因动物技术为核心的公司43 家，并将成为21 世纪生物技术领域的支柱产业。 1998 年全球动物生物技术产品总销售额估计为6.2 亿美元，预计到2010 年仅在农业领域总 销售额将达到 110 亿美元，其中75 亿美元来自转基因动物品种。而利用转基因动物制作生 物反应器生产药品 物和功能蛋白的销售市场预计可达500 亿美元。毫无疑问，转基因动物 正在改变着生物医药、农业生产、环境保护、生物材料，甚至是整个生命科学研究与发展面 貌。利用转基因动物技术，既可加快家畜品种的改良速度，提高肉、奶、蛋的产量和品质， 又可生产珍贵的药物蛋白，为大量患者造福。可以说转基因动物技术对于人们千百年来追求 ， ， ， ， ， ， 的丰衣足食，延年益寿两大目标都会做出具大的贡献。[1 2 3 4 5 6 7] 1 转基因动物的制作方法 1.1 显微注射法 是由美国人Gordon于1980 年首次发明。显微注射法的制作过程是将SV40 的TK基因整合 的质粒以显微注射法注入到小鼠受精卵原核中,首次成功地培育出转基因小鼠。其基本原理 是通过显微镜注射将外源基因直接注射到受精卵的雄原核内,将外源基因整合到DNA 中,发 育成转基因动物。其优点是直接对基因进行操作,整合率较高.缺点是技术难度高,成功率低。 ， ， ， [3 8 15 18] 1.2 逆转录病毒传染法 此法的研究是 1974 年Janenissh等将SV40DNA注入小鼠囊胚腔中，获得转基因小鼠。其 原理是利用逆转录病毒的LTRs区域具有的转录启动子活性这一特点，将外源基因连接到 LTRs的下部进行重组后，再使之包装成为高滴度的病毒颗粒，直接感染受精卵或注入囊胚 中，携带外源基因的反转录病毒DNA可以整合到宿主染色体上。逆转录病毒法的优点是操 作简单，外源基因的整合率高，动物病毒所具有的启动子不但可以引发一些选择标记基因的 表达，还能引发所导入的外源基因的表达，缺点是逆转录病毒载体容量有限，并且外源基因 -1- 难以植入生殖系统。成功率较低。而且逆转录病毒作为载体具有致癌性，所携带的外源基因 ， ， ， ， 片段的长度受到限制，一般不超过10kb。[3 9 11 12 13] 1.3 精子载体法 Lavitrano等 1989 年首次报道把PSV CAT质粒与小鼠的附睾精子共育30m