轻龄和老龄红细胞表面Zeta电位测量条件的研究.pdfVIP

生物物理学报 2013年 11月 第29卷 第 11期：853—862 ACTABIOPHYSICA SINICAVol29No．11Nov．2013：853．862 、^^^^^，．cjb．org．cn 轻龄和老龄红细胞表面Zeta电位 测量条件的研究 吴正洁 ， 王 成2， 康立丽 1．北京理工大学珠海学院化工与材料学院，广东珠海 519088 2．仲恺农业工程学院信息科学与技术学院，广州 510225； 3．南方医科大学生物医学工程学院，广州 510515 收稿 日期：2013．07—13；接受5t期：2013．10．09 基金项目：国家质检总局科技计划项 目(2010QK094) 通讯作者：吴正洁，E—maih wuzhengjiemoon@163．tom 摘要：红细胞表面的电学特性与其结构功能密切相关，而表面Zeta电位是衡量细胞表面电荷 的 重要参数。针对以往研究对轻 、老龄红细胞表面 电荷差异性的争议，利用Percoll密度梯度离心 法分离出轻 、老龄红细胞 ，从细胞表面形态和测量溶液的离子强度两个方面 ，认为测量溶液的 选择不 当，会使红细胞变成棘形 ，导致所测表面Zeta电位 降低。其次 ，溶液的离子强度 与红细 胞表面Zeta电位成反 比关系，在满足细胞 “扩散双 电子层”形成的条件下，应选择离子强度低 的溶液 ，如0．0145mol／LNaC1+0．026molL／萄萄糖溶液，作为红细胞悬浮液用于细胞表面Zeta 电位的测量 ，测出轻龄红细胞 的Zeta电位值为 (一32．46~1．24)mV，老龄红细胞的Zeta电位为 (一25．88~1．39)mV，后者的负电位比前者少 了近20％，其测量结果能准确地反映出轻、老龄红 细胞间表面电荷 的差异。 关键词：红细胞 ；细胞年龄；表面电荷 ；Zeta电位 中图分类号：Q952．7 DoI：】0．3724／SP．J．】260．20】3．30103 引 言 红细胞的表面电荷与红细胞在微循环中的运动性、细胞和细胞间的亲和力、细胞膜的 变形能力等都密切相关 。而细胞表面Zeta电位是表征细胞表面电荷的一个重要参数，可 直观地反映出细胞表面的带电情况，提供诸如细胞表面电荷的性质 f正 ／负性)、带电量的 多少等信息㈣。在细胞表面 Zeta电位的研究中，红细胞生命周期的年轻和老龄细胞 (以下 简称为 “轻龄和老龄红细胞 ”1表面 电荷的差异性，是一研究得最多且争议最大的问题。 Danon等 司指出，老龄红细胞的膜表面Zeta电位相比轻龄红细胞减少，并且认为老龄红细 胞膜表面电荷的变化有利于巨噬细胞对其的快速识别及清除；但 Luner等 则认为他们测 出的轻、老龄红细胞表面 Zeta电位的差别是仪器因素引起的，不是测量样品自身的区别。 分析前人的研究成果发现，他们所采用的细胞表面Zeta电位的测量条件有所不同，例如测 生物物理学报 2013年 第29卷 第 11期 量所用 的红细胞悬浮液 ：Luner[n选用 0．03moFLNaC1和 4．0％ sorbitol的混合溶液 ， Seamant8]选用0．15mol／LNaC1，Yaari[~选用PBS缓冲液作为测量溶液。因此，测量条件的 不统一，可能是导致测量结果出现歧义的原因。 此外，考虑到红细胞是一种特殊的细胞，没有细胞核、细胞器，细胞膜的稳定性较差， 因此，红细胞所处的环境对细胞形状的影响很大，环境条件的不同，会导致红细胞的形状 发生改变，如从双凹形转变成棘形或球形 埘。鉴于红细胞表面Zeta电位的测量是基于其在 电场中的电泳淌度推导而来，而细胞的形状对其电泳淌度也会产生较大的影响 。因而， 细胞形状的改变对红细胞表面Zeta电位所造成的影响可能会严重干扰因红细胞表面带电情 况改变而发生的Zeta电位变化。 再者，Zeta电位的测量需要细胞形成 扩“散双电子层”，它要求溶液中存在有一定量的 电性与细胞表面电荷相反的离子 “l2J。如果溶液中的阳 (阴1离子强度太小，细胞表面吸附 的电荷太少，异性电荷问的相互作用力太弱，则细胞环境中离子强度的微小变化 (如细胞 表面的离子交换行为)，都会造成 扩“散双电子层”的厚度改变很大，导致测量出的电位值 存在较大的误差…2j。但是，如果测量溶液离子强度过大，不仅会形成大的测量电流而导致 温升，而且，过多的离子会吸附在钯电极上并使其发黑，也将导致测量结果不准确。因此， 测量溶液离子强度的选择也是影响细胞表面Zeta电位测量结果的重要因素