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第四章 天然酶的纯化与制备 天然酶制备的基本步骤 天然酶的制备一般包括三个基本步骤： 酶的提取 酶的分离纯化 酶的结晶或制剂 第一节 天然酶的一般制备方法 酶的分离纯化是酶学研究的基础。 研究酶的性质、作用、反应动力学、结构与功能关系、阐明代谢途径，作为工具酶等都需要高度纯化的酶制剂。 如基因工程中所使用的各种工具酶都有高纯度的要求，内切酶中不能含有外切酶，反之一样，否则结果无法判断。 一、酶的提取 酶的提取是指在一定条件下，用适当的溶剂处理含酶原料，使酶充分溶解到溶剂中的过程。也称作酶的抽提。 一、酶的提取 酶提取时首先应根据酶的结构和溶解性质，选择适当的溶剂。大多数酶能溶解于水，可用水或稀酸、稀碱、稀盐溶液提取；有些酶与脂质结合或含较多的非极性基团，则可用有机溶剂提取。为了提高酶的提取率并防止酶的变性失活，在提取过程中，要注意控制好温度、pH值等各种条件。 酶提取的主要方法 根据酶提取时所采用的溶剂或溶液的不同，酶的提取方法主要有盐溶液提取、酸溶液提取、碱溶液提取和有机溶剂提取等。 二、酶的分离纯化方法 酶的化学本质是蛋白质，所以用于蛋白质的分离纯化方法一般适用于酶的分离纯化。此外．酶是具有催化功能的蛋白质，因此根据酶与底物、底物结构类似物、辅助因子、抑制剂等的特异亲和力．可发展酶独