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- 2017-06-11 发布于四川
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①电泳 SDS电泳示意图 ①电泳 等电聚焦在等电聚焦时,蛋白质分子是在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。 不同等电点的蛋白质分子在等电聚焦电泳结束后,会分别聚集于其等电点的位置,这样不同的蛋白质分子就得以分离。 ②离子交换层析 是用离子交换树脂作支持剂的一种层析法。离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成聚苯乙烯酸等不溶性高分子化合物。 ②离子交换层析 R CH COOH NH3+ +M1A+ R CH COOH NH3M1 +A+ 氨基酸(在酸性溶液中) 阳离子交换剂 氨基酸盐 R CH COO- NH2 +M2B - R CH COO M2 NH2 + B - 氨基酸(在碱性溶液中) 阴离子交换剂 氨基酸盐 M1为酸性基团,M2为碱性基团 (4)利用选择性吸附的纯化方法 吸附层析是利用待纯化的分子和杂质分子与吸附剂之间的吸附能力和解吸性质不同,达到使它们分离的目的。 硅胶、氧化铝、活性炭等物质为固体吸附剂,能够将其它分子吸附在表面。 吸附层析的分离效果,决定于吸附剂、溶剂和蛋白质的性质三个因素。 (5)利用对配体的特异亲和力的纯化方法 原理:利用蛋白质分子能与其相对应的配体进行特异的、非共价的、可逆的结合来分离纯化,即亲和层析法。 配体:指能与某些蛋白质进行特异结
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