8种微卫星DNA标记在草原红牛杂交群体中多态性研究.PDFVIP

8 种微卫星DNA 标记在草原红牛杂交群体中多态性的研究1 杨国忠1 2* 3 3 2 3 张嘉保 赵玉民 胡成华 任文陟 张国梁 1 河北北方学院牧工系 河北张家口075131; 2 中国人民解放军军需大学军事兽医系 吉林长春130062 3 吉林省农科院畜牧分院 吉林公主岭 136100 摘要 选用由利木赞与草原红牛杂交后代组成的试验牛群体共计24 头 经过牛血液基因组DNA 的提取 8 对微卫星引物的PCR 扩增 扩增产物的聚丙烯酰胺电泳分型 UVIBAND 计算机凝 胶成像分析系统分析各位点等位基因及全部个体的标记基因型 PPAP3.0 软件计算基因频率 多 态信息含量(PIC)和杂合度等步骤从分子水平上分析了在 8 个位点的遗传多态性 结果表明 BM2113 ETH225 IDVGA2 IDVGA46 IDVGA44 BM 1824 IDVGA55 和TGLA44 这8 个位点 的等位基因数分别为4 5 4 4 5 4 4 和6 多态信息含量 PIC 分别为0.6432 0.5943 0.6593 0.5794 0.7259 0.6121 0.6120 和0.6204 杂合度为0.7034 均属于高度多态性位点 用于寻找与 生产性能相关的遗传标记的研究是较理想的 关键词 微卫星DNA 标记 草原红牛 中图分类号 S823.8 草原红牛是由我国吉林 内蒙 河北 辽宁四个北方省分几十年的联合攻关培育出来的我国第 一个肉乳兼用型优良品种 它是以英国兼用短角牛为父本 以当地蒙古牛为母本经过级进杂交至第 二代或第三代 选择理想型个体进行横交固定培育而成的 主要分布在河北的坝上, 内蒙古的锡林郭 勒盟 昭乌达盟及吉林白城地区等高寒草原,具有适应性强 宜放牧 耐粗饲 抗病能力强 乳脂率 高 肉质好等突出优点 但与国外优良肉牛品种以及国内黄牛品种相比还存在着个体小 生长缓慢 产肉性能偏低等不足 为了提高草原红牛肉用生产性能 国家高技术研究发展计划(863 计划)将其列为中国优质特色肉 牛新品系选育与品种开发的对象 先后从国外引进优良肉牛品种如丹麦红牛和利木赞牛等对其进行 杂交改良 胡成华 于洪春等对丹麦红牛和利木赞牛改良后代进行的生产性能测定表明 用利木赞 牛改良草原红牛 能有效地提高草原红牛的产肉性能 可以作为草原红肉牛新品系选育的一个良好 的杂交组合[1,2] 近年来随着现代分子生物学技术的发展 一些高效的分子遗传标记将各种畜禽的遗传图谱研究 推向深入 为将复杂的数量性状分解为多个数量性状基因座进行定位分析 提供了研究单个基因特 性的手段 为动物育种从数量性状的表型操作深入到基因型操作奠定了基础 微卫星DNA 作为一种 分子遗传标记 与其他分子标记相比具有 数量多且均匀的分布在大多数真核及少数原核生物的基 因组中 丰富的多态性 易于检测 具有保守性 等显性遗传等突出优点 因此已被广泛应用于畜 禽遗传育种之中 本研究利用微卫星标记技术研究草原红牛杂交后代遗传多态性 旨在为进一步寻 找与生产性能相关的遗传标记以及草原红肉牛新品系的选育提供理论依据 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验牛样品 本试验选用吉林省农科院畜牧分院牛场饲养的利木赞和草原红牛杂交改良牛共 计24 头 其中杂交一代 F1 二代 F2 和三代 F3 分别为13 6 和5 头 颈静脉采血 EDTA 抗凝 -20 保存备用 1作者简介 杨国忠 1963 男 河北定兴人 副教授 硕士 研究方向 分子遗传与动物育种 通讯作者 张嘉保 1963 博士 教授 博士生导师 研究方向 动物繁殖技术与遗传标记 1 1.1.2 主要试剂 Taq DNA 聚合酶 4 dNTP 蛋白酶K RNAase Tris 饱和酚 Tris EDTA DNAMarker N N ˊ 亚甲双丙烯酰胺 TEMED 尿素 过硫酸铵 丙烯酰胺 硝酸银 亲水硅烷 疏水硅烷 引物等 1.1.3 主要仪器 PCR 仪 高速冷冻离心机 高速台式离心机 核酸测序电泳