活体蛋白质功能地光学分子成像新技术新方法2012年2月项目.PDFVIP

国家重大科学研究计划(2011CB910400) 活体蛋白质功能的光学分子成像新技术新方法 2012年2月项目简报 课题1： 活体微环境中多蛋白质分子事件快速并行检测的飞秒激光扫描显微成像 在活体高分辨显微光学成像的多信号快速并行获取方面 ，（1 ）完成了基于多边 形转镜的快速多通道多光子显微成像系统的硬件搭建，编写了系统的控制软件，并 开始进行图像的数据采集；（2 ）采用线性光谱拆分算法和Masking 光谱拆分算法， 在活细胞和活体动物的多光子激发成像中，成功地实现了GFP 和YFP 荧光信号的光 谱拆分。在活体内蛋白质与细胞功能的动态监测与定量表征研究方面 ，（3 ）应用活 体光学成像技术动态监测细菌诱导的迟发型变态反应过程中单核巨噬细胞的募集与 运动，定量描述荧光标记细胞的平均速度、位移、滞留系数、运动轨迹等参数；（4 ） 建立了体外Rap1GTP 检测技术，发现Pep-RBD 能通过竞争抑制细胞内活性Rap1GTP 抑制Integrin 介导的细胞粘。本季度已正式发表 SCI 收录研究论文2 篇，影响因子 均大于 5。 课题2：基于高分辨光声成像的蛋白质功能信息的跨层次多尺度获取与整合 按照973 课题2012 年任务书的计划，课题组建立高分辨的新型光学分子成像系 统；变换超声探测器的接收主频，研究主频特性对应分辨率和成像深度的关系；研 究激发探测模式，进一步改进成像空间分辨率和图像对比度；研究高频探测的特性， 研究改进光声小角度滤波反投影成像算法；开展高分辨蛋白质示踪光声成像实验。 目前，已建立活体动物光声-荧光显微镜成像系统，并申请了国家发明专利，开展了 初步的光声荧光互补成像实验研究；构建了临床适用型的功能光学纳米探针；开展 了在体动物功能蛋白质的光声显微成像研究。主要结果刊登在国际知名杂志 Biomaterials, Mol. Pharmaceut ，Cellular Signalling ，Appl. Phys. Lett.。 课题3 ：用于活体光学成像的分子探针与标记方法 大力推进功能型成像对比剂的研究，包括：1 ）在设计、合成各种人工短肽的基 - 1 - 国家重大科学研究计划(2011CB910400) 础上，广泛筛查可与特定短肽进行专一性结合的活性标记基团，并将其与高性能光 学分子探针进行化学偶联；2 ）针对一些长寿命和长波长荧光分子探针进行功能化改 性，将长寿命发光的稀土配合物改造成可进行荧光-顺磁共振双模切换的分子探针， 将近红外花菁染料改造成可由金属离子诱发比率荧光信号的光学分子探针。上述两 部分内容的联合，将成为设计具有靶向标记功能且标记前后光信号对比度大的“智能 型”光学成像探针的技术支撑。目前相关研究进展顺利，本季度已正式发表SCI 收录 研究论文3 篇，已接受的研究论文2 篇，其中IF 5 的有3 篇。 课题4：免疫应答过程相关蛋白质功能的光学分子成像研究 本课题拟解决的关键科学问题是在体蛋白质功能的跨层次信息整合，在本季度 工作中，我们紧密围绕年度计划，主要完成以下 5 个方面的工作：1 ）建立活细胞/ 活体内多蛋白质分子事件高分辨定量获取及整合的光学分子成像系统，初步在活细 胞水平观测免疫突触形成；2 ）建立MHC-1 类分子转运的研究模型；3 ）研究不同细 胞内吞方式在外源性抗原（模型）内吞及回收中的作用和影响；4 ）建立活体标记细 胞及动物模型。设计构建荧光标记 T/DC 细胞间免疫突触形成关键分子 TCR 及 ICAM-1 ；5 ）开始构建T 淋巴细胞攻击宿主的小动物模型；6 ）开始观察生物活性细 胞迁移能力变化时的细胞构象。 - 2 -