一氧化碳血红蛋白的一阶导数光谱测定法.pdfVIP

第27 卷,第4 期 　 　 　 　 Vol. 27 , No . 4 2 0 1 0 年 7 月 Chinese Journal of Sp ectroscop y L aboratory July , 2 0 1 0 一氧化碳血红蛋白的一阶导数光谱测定法 陈南 (福建省测试技术研究所　福州市北环中路61号　350003) 　研究血液中碳氧血红蛋白浓度在连二亚硫酸钠还原前后导数光谱的变化, 建立血液中碳氧 血红蛋白的565nm 一阶导数光谱定量测定方法。方法在0—100%范围内线性关系良好, 不同浓度的平均 回收率99. 9% 。结果表明, 本方法准确快速、结果令人满意。 一氧化碳; 碳氧血红蛋白;导数光谱法 :O657. 32:B: 1004-8138(2010)04-1655-04 1　引言 一氧化碳是由于含碳物质在氧气供给不足的情况下燃烧而产生,它是一种常见的导致人中毒 死亡的毒物。一氧化碳与血红蛋白的结合力比氧与血红蛋白的结合力大250—300 倍,而碳氧血红 蛋白的解离速度又比氧合血红蛋白慢得多, 因此中毒后一氧化碳对人体有持久的毒害作用,妨碍了 血红蛋白的携氧功能, 造成机体组织缺氧坏死, 危 人的生命。因此生活中常见冬季室内生火取暖 或使用燃气热水器通风不良而发生的一氧化碳中毒事故。 人体内正常水平的一氧化碳血红蛋白(HbCO) 含量为0. 5%左右, 安全阈值约为 10% 。当 [ 1] HbCO 含量达到25%—30%时,显示中毒症状并陷入昏迷;HbCO 含量达到70%时死亡 。因此通 过测定血液中的HbCO 可判断CO 中毒的程度, 在临床上有重要意义。目前临床实验室多采用定性 的方法检测血液中的 含量;定量检测方法多采用 -血氧分析仪法和双波长分光光度法[2] HbCO CO 进行。本文建立了血液中HbCO 的一阶导数光谱定量分析方法。试验表明,该方法操作简便、快速, 灵敏度高。 2　实验部分 2. 1 2. 1. 1　仪器与试剂 BECKMAN DU-650 紫外可见分光光度计(美国贝克曼公司) 。 保险粉连二亚硫酸钠( 2 2 4) ,分析纯。 Na S O 正常人血液: 不吸烟健康人的静脉血液不含HbCO。 [3] 碳氧血红蛋白饱和血 :按照装置图1将烧瓶、洗气瓶和装有血液的三角瓶连接好, 在烧瓶中 加入硫酸20mL, 分液漏斗中加甲酸10mL, 洗气瓶中放20%氢氧化钠溶液 100mL, 三角瓶中加 联系人,手机:(0)E-mail:chennan ;nancy0430 作者简介: 陈南( 1971—) , 女,福州市人, 工程师, 从事食品、环境 毒物分析。 收稿日期:2010-04-23;接受日期:2010-05-24 1656 光谱实验室 第27 卷 10 正常人的血液(加0.05 柠檬酸钠作抗凝剂) 。扭开分液漏斗 mL g 活塞,往烧瓶中加入甲酸10 。缓缓加热烧瓶, 即有一氧化碳气体 mL 产生。10mL 血液通一氧化碳1—1. 5h 即可使碳氧血红蛋白浓度达 100%, 通气速度不要太快,为避免通气时产生大量泡沫外溢, 可加 一滴消泡剂如辛醇。 2. 1.2　方法原理 在分光光度法中, 如果其他组分的吸收重叠在吸收峰上会受 干扰; 导数光谱法采用微分求导, 在谱图上显示微小的变化,使光 图 1　制备HbCO 饱和血 谱图的分辨率得到了很大的提高。因而导数光谱法是解决干扰物