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2）???????????? 染色方法 A、???????????? 手工染色 ①??? 单染色：用一种染色液；一般材料铅染好，免疫组化铀染好。 ②??? 双染色：先用醋酸铀染色，再用柠檬酸铅染色。 ③??? 块染色：锇酸固定后，脱水前用50%-70%的乙醇醋酸铀染液染色20-30min，也可在脱水过程中放入含1%-2%的醋酸双氧铀的70%乙醇染液染2-10h（4oC冰箱）这样可以省去切片后的铀染过程。 B自动染色：自动染色使用事先制好的，已商品化的醋酸铀和柠檬酸铅，在自动染色仪内进行电镜常规染色。 * * * 3）常用的几种固定剂 A 四氧化锇（osmium tetroxide,OsO4）亦称锇酸：锇酸实际上不是酸，它的水溶液是中性的，为一种强氧化剂。0.5-1g包装，淡黄色晶体。具有挥发性和毒性，在室温下易挥发，其蒸气对粘膜有刺激作用，在通风橱内径相配制。 * ?优点①对蛋白质和脂类固定较好。②对作为细胞骨架的磷酸脂蛋白的作用好，对核蛋白保护作用很好，因为在有机体内核酸和碳水化合物与蛋白制成复合的形式，因此锇酸几乎和所有的细胞成分结合。③分子密度高，产生良好的反差，因此锇酸固定本身也起到生物染色作用。 缺点①不能固定糖元和核酸，对微管固定较差。②扩散慢，穿透能力差。③具有挥发性和粘膜毒性。④不适于进行细胞化学工作。 * B戊二醛（glutaraldehyde,C5H8O2）