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万古霉素软膏剂制备及效果评价 　　摘 要 制备出具有良好抑菌效果的万古霉素软膏，并初步评价其透皮释放性能。采用乳化法制备O/W型和W/O型两种万古霉素软膏。通过比较这两种软膏的物理性状、体外透皮释放率、体外抑菌、动物药效学等质量评价实验结果，确定更优的软膏剂制备处方并初步建立万古霉素软膏剂透皮实验方法。实验结果表明，O/W型万古霉素软膏的制备工艺简单，制剂稳定性好，抑菌效果快速强效 关键词 万古霉素 软膏剂 透皮制剂 生物被膜 中图分类号：R681.2 文献标识码：A 万古霉素是一种糖肽类抗生素，临床上主要用于治疗由其他抗生素不敏感的革兰氏阳性菌所引起的严重感染，如肺炎等。随着抗生素的乱用，导致细菌感染的疾病增多，终止最为抗生素最后一道防线的万古霉素的临床使用增加，为了更好地指导临床用药，有必要对万古霉素软膏剂进行研究 1材料 2000高效液相色谱仪（日本日立公司），RYJ-6B 药物透皮扩散试验仪（上海沪粤明科学仪器有限公司），AB135-S 电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司），XK97-A 菌落计数器（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司），DHP-9162电热恒温培养箱（上海市齐欣科学仪器有限公司），SW-CJ-TD 无菌操作台（苏州净化有限公司），S-3000N ?呙璧缇担?HITACHI）。万古霉素（大连美伦生物技术有限公司），十八醇、丙二醇、白凡士林、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十二烷基磺酸钠、液状石蜡均为药用级 2方法 2.1处方的组成 根据查阅的相关文献和单因素实验筛选出了W/O型和O/W型2个最优处方。W/O型处方：单硬脂酸甘油酯15g，硬脂酸5.0g，白凡士林15g，液状石蜡14g，氢氧化钙的饱和水溶液50g，万古霉素1.0 g。O/W型处方：十二烷基硫酸钠1.5g，白凡士林17g，丙二醇10g，水50g，十八醇20g，氯化钙0.5g，万古霉素1.0g 2.2软膏剂制备 2.2.1 O/W型软膏剂的制备 称取处方标识量中的十八醇、丙二醇、白凡士林，在70℃的水浴下加热融化为油相，称取处方标识量的氯化钙、万古霉素、水，在70℃的水浴下加热融化为水相。然后再剧烈搅拌，将水相缓缓倾入油相中，使其成软膏状，即得到O/W型万古霉素软膏剂 2.2.2 O/W型软膏基质的制备 按2.2.1中方法进行制作，只是不加主要万古霉素 2.2.3 W/O型软膏剂的制备 称取处方中标识量的单硬脂酸甘油酯、液状石蜡、硬脂酸、白凡士林，在70℃的水浴中加热融化为油相，称取处方标识量的万古霉素、氢氧化钙的饱和水溶液，在70℃的水浴中加热融化为水相。在剧烈搅拌下，将水相缓缓倾入油相中，使其成软膏状，即得到W/O型万古霉素软膏剂 2.2.4 W/O型软膏基质的制备 按2.2.3中方法进行制作，只是不加主要万古霉素 2.3质量评价 2.3.1性状观察 对两种软膏剂的颜色及外观形态进行观察 2.3.2稳定性考察 （1）耐热耐寒实验。分别取适量的W/O型和O/W型软膏剂，在55℃的恒温水浴中保存24h，取出后放至室温，再在-20℃下放置24h，最后取出样品，观察样品有无液化、变色、分层、粗化等现象 （2）高速离心实验。分别称取适量的W/O型和O/W型软膏，在4000 rmin-1转速下离心30 min，观察有无分层、液化等现象 2.4体外透皮释放量测定 2.4.1建立标准曲线 精密称取万古霉素2.02mg于容量瓶中，用蒸馏水定容至10mL，摇匀，作为储备液。紫外分光光度计全波长扫描确定万古霉素的最大吸收波长为236nm，以236nm作为检测波长 （1）液相色谱条件 Diamonsil C18色谱柱（150mm?？.6mm，5 m）；流动相是乙腈-0.05mol/L磷酸铵缓冲盐（8∶92）；检测波长236nm；流速1mLmin-1；最低检测限0.8ng （2）线性回归方程的确定 精密配制浓度分别为3.1625 gmL-1、6.325 gmL-1、12.65 gmL-1、25.3 gmL-1、50.6 gmL-1、101.2 gmL-1、202.4 gmL-1的万古霉素溶液，以236nm作为检测波长，每次进样量10 L，将浓度与峰面积进行回归即可得标准曲线 （3）回收率实验 称取适量万古霉素，配制浓度分别为5.0 gmL-1、50 gmL-1、150 gmL-1的标准溶液。将三种不同浓度的万古霉素溶液各分为两份，分别在每份中加入W/O型和O/W型基质，在70℃水浴中使基质全部融化，混匀，离心，用0.22 nm的虑膜过滤，经HPLC分离后在236nm处检测，计算其回收率 2.4.2离体鼠皮的