高效液相色谱法测定忍冬藤和叶中8种活性成分(10个产地).pdf

第 35 卷 分析化学 (FENXIHU人粥UE) 研究报告 第 8期 2以】7年 8月 ChineseJ洲rnal可Ana王yticalChennst口 1159~1163 高效液相色谱法测定忍冬藤和叶中8种活性成分 钱正明 李会军 李 萍 ‘汤 丹 秦素娟 (中国药科大学现代中药教育部重点实验室，南京210038) 摘 要 建立了多波长分析忍冬藤和叶中化学成分含量的高效液相色谱分析方法，色谱柱为A幼entZ()rbax 80A，Exte】ld一C.:(46mmx25omms四);流动相为0.3% 甲酸一乙睛，梯度洗脱;流速为15m口min;检侧波 长为2钓、330、360nm;柱温38弋。各指标成分的检出限均低于。29m留L;精密度RsD均低于2.29%;标准 加入的回收率为引.2% 一103.6%。应用新建立的方法测定了7个不同产地忍冬藤和叶中8种活性成分的 含量。该方法简单、快速、准确，可用于忍冬藤和叶的质量控制。 关键词 忍冬，藤，叶，高效液相色谱 1 引 言 忍冬科忍冬属植物忍冬(肠n滋rajaPonicaThu汕.)的花和藤均可药用，分别为药典收载品种金银花 和忍冬藤一’」。忍冬叶为金银花和忍冬藤的副产物，产量较高，却一直被视为非药用部位而长期未得到 充分利用，造成了资源的浪费。中国古代曾以忍冬叶人药，直到宋代才逐渐被花所替代。同时现代研究 也表明忍冬叶有抗氧化、抗菌等生物活性，它被用来治疗急性腹泻等疾病。 前人对忍冬植物的分析研究卞要集中于对花的分析，卞要方法有HPlc 一Uv，H毗一E“D，cHPLC- Uv，CHPLC一MS，CE一UV等，而且主要集中在对其中的1类或2类活性成分进行定量分析 「卜刘。本研究 为了更好的开发利用忍冬叶，充分发挥其药用价值，应用HPIJC一DAD多波长同时检测的方法对7个不 同产地忍冬的藤和叶的8种化学成分进行了比较分析·本方法简单可·靠，不仅可以用于分析忍冬藤和 叶成分的差异，还可以用于忍冬藤和叶的质量控制。 2实验部分 2.1 仪器与试药 高效液相色谱仪Aslientlloo系列(G1313A自动进样仪、G1316A柱温箱，二元泵G1312A，DAD检 测器);HS3120型超声波提取器(淮阴汉邦科技有限公司)。 对照品:绿原酸(1)、咖啡酸(2)、马钱子昔(3)、当药昔(4)、，ecoxylo邵nin(5)、木犀草昔(6)、芦丁 7)〔和异绿原酸(8)，由实验室自制，并经波谱数据和文献 8「一12]核对的方法确定了它们的结构(图 1)，HPLC归一法确定其纯度均大J几98%;忍冬药材于2006年11月采自全国不同省市，经作者鉴定为 忍冬科植物忍冬(加nicerajaP。而caThunb.)的藤和叶;乙睛为色谱纯(Merck公司);超纯水由Milli一Q系 统制备(MilliPo，，BCdford，MA，USA);甲酸为分析纯(南京化学试剂厂)。 2.2 实验方法 2.2.1液相色谱条件 色谱柱:Aglicrltzorhax80A，Extend一CI。(25ornox4.6mm，5卜:。)，sB一Cl，预柱; 流速1.5oUmin;柱温38℃;进样量15林L;检测波长240、330、360nm;流动相为0.3%甲酸水溶液(A) 和乙睛(B);洗脱程序如下:0一9o1;。「，11%B;9一12。，in，11%一17%B;12一16min，17%B;16一20 min，17%一20%B;20一30min，20%一90%B;30一35min，90%一11%B。 2.2.3 供试品溶液的制备 称取样品粉末(过60 目筛，粒径0.3mm，60℃烘31，)19，置具塞锥形瓶 中，加人50%甲醇25 mL，称定重量，超声提取45 Inin，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足重量 ，摇匀， 21划卜，2一5收稿;2侧J7拱刁〕接受 本文系国家杰出青年科学基金(N030325046)资助 *E_mail.linino2你科@126eom 万方数据 1160 分 析 化 学 第 35卷 11t之茸1一 。一心一厂如日 一6王【 叹火。H