cdna文库构建.ppt

cDNA文库的构建 主要内容 基因文库的概念及意义 cDNA基因文库的类型 几种cDNA文库的介绍 SMART技术构建全长cDNA文库 一、基因文库的概念及意义 基因文库与基因库（gene bank） 区别 基因文库与基因克隆 构建基因文库的意义 根据基因类型（重组DNA片段的供体） 基因组文库和cDNA文库 1、基因组文库 cDNA文库优点 注意 3、 cDNA文库和基因组文库的区别 亚克隆文库 二、 cDNA基因文库的类型 依据起始mRNA是否经过标准化预处理 ：非标准化cDNA文库和标准化cDNA文库 文库功能：克隆文库和表达文库 载体类型：质粒、噬菌体、粘粒和人工染色体文库 根据文库构建过程中是否对克隆进行过全长选择分为普通cDNA文库和全长cDNA文库 依据第一链反转录引物不同分为随机引物cDNA文库和Oligo d (T) cDNA文库 （一）非标准化cDNA文库和标准化cDNA文库 （二）根据文库的功能分：克隆文库和表达文库 （三）不同载体文库 构建文库的载体 1.λ噬菌体载体 基础：裸露的噬菌体重组DNA转化宿主细胞或包装后转染宿主细胞。 载体筛选：在细菌菌苔中形成噬菌斑。 重组筛选： 插入载体—通过可见标记的插入失活(cI基因的打断阻止溶源性，产生的噬菌体更清澈；现代的载体携带lacZ基因，以兰-白筛选)。 置换载体