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- 2017-06-09 发布于北京
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复方黄芪多苷在抵抗大鼠急性肝损伤发挥保护作用
桂双英,魏巍,王华,孙无疑,吴成一
急性肝损伤(ALI)是联合内毒素血症,微循环障碍以及炎性细胞 (如巨噬细胞,淋巴细胞)释放炎症介质和细胞因子(如肿瘤坏死因子-α(TNF -α),白细胞介素1白细胞介素( IL - 1 )[1]。引起病毒性肝炎的原因主要是酗酒, 铁含量超标,或药物毒中。它的发病率和死亡率非常高。治疗可抗炎或抗氧化剂的过程中。由于其副作用大许多西方现代药品已经代替了它, 取得了满意的成果, 然而,人们发现一些中药(如黄芪牡丹帕尔,黄芪,丹参,虫草冬虫夏草,银杏,胡黄连),有在治疗中有特殊的优势,研究表明比其他治疗肝脏疾病的药更有效性,价格低廉且副作用小[2] 。
导言
ALI是在小鼠体内成功地诱导注射四氯化碳(CCl4)腹腔和尾静脉注射卡介苗(卡介苗)和脂多糖(LPS),这两组每个都分为正常组,模型组即FFHQ(60,120和240毫克/千克)治疗组,在实验结束时各级丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),丙二醛(MDA)超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的测定利用肝匀浆生化法。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1的)活性的确定利用放射免疫分析法。肝组织切片染色,苏木精和伊红在光学显微镜下观察[3]。
在传统中药(中医)治疗的基础上全面分析了患者的症状和自身特征[7]复方黄芪多苷黄芪(FFHQ)是一种中药提取黄芪液的处方组成,黄芪芍药影响FFHQ诱导卡介苗(卡介苗)+脂多糖(毒素)四氯化碳诱导的大鼠急性肺损伤,为了探讨丙二醛(MDA)超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性的采用肝匀浆测定。
实验
材料
四氯化碳,北京化工厂。内毒素大肠埃希氏菌由西格玛化工有限公司(圣路易斯,密苏里州,美国)提供。卡介苗(上海生物研究所)黄芪,丹参和黄芪芍药甘草来自中国安徽和医堂。这些药草混合在指定的比率乙醇:沸水:95 %乙醇(1:4:0.8)条件下提取,这些草药的数量比例以2:1,混合储存在0-4℃24小时,然后过滤和出蛋白质和淀粉,加热到90-95℃蒸发剩余酒精得黄褐色粉末。FFHQ主要是由白芍总苷,总黄芪总甙,总黄酮黄芪,黄芪多糖等。主要有效部分是FFHQ。FFHQ溶解在0.5 %氯化钠中。
动物
雄性昆明种小鼠( 20 ± 2 g ),安徽医科大学。小鼠保持在12小时光/暗的环境周期中。动物活动自如,有充足的食物和水。所有小鼠禁食16小时后血液/组织液取样.所有的实验依据操作准则进行。
建立化学性肝损伤模型[ 8-10]
取2.5毫克剂量的卡介苗(可行杆菌)投入0.2毫升生理盐水中,经尾静脉注射到每个动物体内,和10天后,注入7.5微克毒素溶解于0.2毫升生理盐水。这三只老鼠乙醚麻醉,颈椎脱位16h后内毒素注射。其他CCl4诱导肝损伤情况下一样通过上述方法预以处理研究。
药物治序
测量血清ALT,血清TNF–α和IL–1
血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)建成生物科技研究院(南京,中国)。ALT和AST为国际单位(ü/L)纳克每毫升。血清TNF -α和IL-1 北京生物科技有限公司。
肝匀浆法测量MDA,SOD及GSH–Px
肝脏解冻,体重和匀浆在盐酸(5 mol / L的含2 mmol / L的乙二胺四乙酸,pH值7.4)。匀浆离心(1000转/分,10分,4次)上清液立即使用上清液检测 MDA和SOD。测定下面的 MDA,SOD及GSH - Px活性。简言之,硫代巴比妥酸法的确定肝组织的MDA含量。重复测定所有样品中MDA含量三次。检测超氧化物歧化酶抑制氧化黄嘌呤是根据黄嘌呤氧化酶系统。红色产物(亚硝酸盐)在吸光度550 nm左右所产生一个单位(U)为超氧化物歧化酶,活所有样品进行了测定三次 。
病理分析
福尔马林固定标本,石蜡包裹苏木精和伊红染色。大鼠肝脏标本,放置在100毫升/升福尔马林溶液中并日常的石蜡包埋处理。苏木精伊红染色在光镜检查(奥林巴斯,日本)。容量可以用每毫克蛋白数表示。
统计分析
有效值为平均值±标准差。统计分析数据的多重比较是由单向方差分析之后,邓肯的试验。对于单一的比较,不同学生的t检验意义不同。A级的P“0.05被视为统计学意义。
结果
FFHQ对血清ALT,血清TNF -α和IL–1的影响
转移的血清转氨酶和肝功能导致肝细胞损伤,均显着高于卡介苗+脂多糖诱导组和CCl4组较对照组中的两种模式。FFHQ(60,120,240毫克/公斤体重)的活动明显减少血清转氨酶和ALT。TNF-α和IL-1血清中的卡介苗+脂多糖诱导组比对照组的免疫小鼠模型均高。FFHQ(60,120,240毫克/千克体重)血清TNF-α和IL-1的免疫小鼠模型显
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