第14章细胞增殖调控与癌细胞精选.ppt

* 一、原癌基因： * 二、癌基因与抑癌基因： 1.癌基因： 存在于细胞基因组中(c-onc)，编码多种类型的蛋白质； 癌基因功能获得性突变(显性突变)，其产物量增加或活性升高，促进细胞癌变 2.抑癌基因 ◆这类基因编码的蛋白抑制细胞增殖，使细胞停留于检验点 ◆抑癌基因的突变是功能丧失性突变(隐性突变) ◆P53基因（发现的第一个抑癌基因）突变将导致细胞癌变或凋亡 * * 三、癌症产生是基因突变积累和自然选择的结果 癌症主要是体细胞突变产生的遗传病，涉及到两大类与细胞增殖相关的基因的突变。 ●促进细胞增殖相关基因突变：原癌基因(proto-oncogene)突变形成癌基因(oncogene) ●抑制细胞增殖相关基因突变：肿瘤抑制基因(tumor-suppressor gene)，抑癌基因 ●细胞癌变是基因突变累积和自然选择的结果，所以患者多为年长者。 ●原癌基因与肿瘤抑制基因产物协调作用，避免细胞癌变 * 抑癌基因的功能丧失性突变----阴性突变 * P53基因突变将导致细胞癌变或凋亡 * 四、致癌因素 ●多种理化因子致癌 ● DNA肿瘤病毒与RNA肿瘤病毒致癌 * * 第十四章 细胞增值调控 与癌细胞 第一节 细胞增殖调控 MPF的发现及作用 p34 cdc2蛋白激酶的发现及与MPF的关系 周期蛋白 CDK 细胞周期运转调控 * * 一、MPF的发现及作用 成熟促进因子(maturation promoting factor，MPF）,早期称为M-期促进因子(M-phase promoting factor, MPF)，是指M期细胞中存在的促进细胞分裂的因子 * 研究背景 ? 1970s Rao等发现与M期细胞(Hela)融合的间期细胞染色体发生凝缩，称为早熟凝集染色体（PCC）。 G1期PCC为单线状，因DNA未复制。 S期PCC为粉末状，因DNA由多个部位开始复制。 G2期PCC为双线染色体，说明DNA复制已完成。 图 不同类的M期细胞都可诱导PCC产生，说明M期细胞具有促进间期细胞进行分裂的因子，即成熟促进因子( MPF)。 * prematurely condensed chromosome，PCC G1 S G2 * ?非洲爪蟾卵发育的实验 ◆研究思路 ◆实验设计（注意关键步骤的用意！！！） ●材料的选择：卵母细胞发育的第Ⅳ期，含有一个较大的小核，易辨认。 ●方法： ●实验结果： * 卵细胞提取物注射实验 * 二、p34 cdc2蛋白激酶的发现及与MPF的关系 p34 cdc2蛋白激酶的发现 周期蛋白的发现 MPF的组成 * p34 cdc2蛋白激酶的发现： Hartwell 1960s, Nurse 1970s 分别以芽殖酵母和裂殖酵母为材料，利用温度敏感突变株，发现许多与细胞分裂有关的基因( cdc)。如： 裂殖酵母cdc2、 芽殖酵母cdc28突变型在限制温度下无法分裂； cdc2和cdc28都编码一个34KD的蛋白激酶（称为p34 cdc2蛋白和p34 cdc28蛋白），促进细胞周期的进行，若该基因发生突变，细胞周期就会停止在某一点，细胞就不会再分裂。 * ?细胞周期蛋白的鉴定 T. Hunt 1980s等以同步化的受精的海胆卵为材料进行研究，发现海胆的卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期振荡，命名为周期蛋白（cyclin ）A和B，其mRNA能诱导蛙卵成熟。 1988年Lohka将非洲爪蟾的MPF纯化。经鉴定MPF由34KD和45KD两种蛋白组成，是一种丝氨酸/苏氨酸激酶。进一步的研究发现MPF=cdc2+clyclin B * ?MPF的结构组成 ◆是由两个不同的亚基组成的异质二聚体: ●催化亚基 ▲是丝氨酸/苏氨酸型蛋白激酶 ▲其活性有赖于周期蛋白，故蛋白称为周期依赖性蛋白激酶(CDK); ●调节亚基：周期蛋白(cyclin)。 图 * MPF的结构 * 三、细胞周期蛋白cyclin 特点：在细胞周期中呈周期性变化。含有一段约100个氨基酸的保守序列，称为周期蛋白框，介导与CDK结合。 M期周期蛋白N端有破坏框，参与周期蛋白A和B的降解。 作用：激活和引导CDK作用于不同底物。已知30余种，在脊椎动物中为A1-2、B1-3 、C、 D1-3、E1-2、F、G、H等。可分为4类：G1型、G1/S型、S型、M型。 * 四、CDK cdc2与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性，故名细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)。 cdc2又称CDK1，可将特定蛋白磷酸化，如： 将核纤肽磷酸化导致核纤层解体、核膜消失； 将H1磷酸化导致染色体的凝缩等。 在动物中已知7种CDK。均含PSTAIRE保