第2章染色体与DNA精选.ppt

（二）转座子的类型和结构特征 1.原核生物转座子的类型： 1、插入序列(IS序列) 2、复合转座子(composite transposon) （1）末端带有IS序列的转座子 （2）TnA家族 插入序列（insertional sequence, IS） 1.最简单的转座子,不含有任何宿主基因。 2.是很小的DNA片段(约1kb)，末端具有倒置重复 序列。 3.转座时常复制宿主靶位点4～15bp的DNA形成正向重复区。 4.是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。 是很小的DNA片段(约1kb)，末端具有倒置重复序列。 转座时常复制宿主靶位点4～15bp的DNA形成正向重复区。 （1）末端带有IS序列的转座子 1.是一类带有某些抗药性基因(或其相关基因)的转 座子 2.两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列。 3.IS序列不能再单独移动，只能作为复合体移动。 复合式转座子（composite transposon） 1.没有IS序列的、体积庞大(5000bp以上)的转座子。 2.常带有3个基因，一个编码β-内酰胺酶(AmpR)，另 两个则是转座作用所必须的。 3.所有TnA类转座子两翼都带有38bp的倒置重复序列。 （2）TnA家族 转座子TnA的结构示意图 2、转座作用的机制 转座发生时，受体分子中有一段很短的（3～12bp）被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 （1）复制性转座 （2）非复制性转座 复制性转座 (Replicative Transposition) A.整个转座子被复制，所移动的仅仅是原转座子的拷贝。 B.TnA类主要是这种形式 A.原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 B.IS序列及Tn5等都以这种方式进行转座。 非复制性转座 (Nonreplicative Transposition) 3、转座子的遗传效应 （1）转座引起插入突变,导致结构基因失活。 （2）插入位置出现新的基因。 （3）引起染色体的畸变。 （4）引起生物进化，使相距很远的基因组合到一起产生具有新的功能的基因或蛋白质分子。 * 例： 在动物卵细胞形成过程中， rDNA可进行几千次不同比例的复制，产生2×106个拷贝，使rDNA占卵细胞DNA的75%，从而使该细胞能积累1012个核糖体，以合成大量蛋白质供细胞分裂之需。 * * * * * * * * * 12~13；27~29. * * 真核生物DNA复制与核小体装配是同步进行的，复制完成后随即组合成染色体并从G2期过渡到M期。 染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 复制中冈崎片段的连接，复制子之间的连接，都易于理解，因为都可在线性DNA的内部。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。剩下的DNA单链母链如果不填补成双链，就会被核内的DNase酶解。 四、端粒酶参与解决染色体末端复制问题 端粒（telomeres）由富含TG的重复序列组成。是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段DNA-蛋白质复合体，它与端粒结合蛋白紧密结合。 作用是保持染色体的完整性，维持染色体的稳定性和DNA复制的完整性。 前导链产生完整的子染色单体。 后随链模板3?端留下未复制的ssDNA区。 端粒酶（telomerase）是一种核糖核蛋白（RNP），由RNA和蛋白质组成。 端粒酶以自己的RNA组分作为模板，以染色体的3?端ssDNA（后随链模板）为引物，将端粒序列添加于染色体的3?端。 端粒酶催化作用的爬行模型 端粒酶RNA辨认及结合母链DNA并移至3’端，开始逆转录复制，延伸足够长度后，端粒酶脱离母链，DNA-pol取代之，此时3’端折回来，同时起引物和模板的作用，在DNA-pol催化下完成末端双链的复制。 哺乳动物的细胞周期 DNA合成期（S期） G1 G2 S M 五、真核生物染色体DNA在每个细胞周期中只能复制一次 真核所有染色体DNA复制仅仅出现在细胞周期的S期，而且只能复制一次。 四、DNA的修复 (DNA repairing) DNA修复是细胞对DNA受损伤后的一种反应，但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。 DNA损伤来源 1、碱基的脱落（酸和热） 2、碱基或核苷的改变（电离辐射和烷化剂等） 3、错误碱基 4、碱基的缺失或插入 5、嘧啶碱基的二聚化 6、链的断裂（化学试剂或电离辐射） 7、DNA链的交联 大肠杆菌中DNA的修复系统 DNA修复系统 功 能 错配修复(mismatch repair) 识别错配加以校正 切除修复(碱基、核苷酸切除修复) 切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复