蛋白质与多肽在反相色谱柱上色谱保留行为的比较研究.pdfVIP

LC一117 蛋白质与多肽在反相色谱柱上色谱保留行为的比较研究 张养军王京兰李蕾应万涛蔡耘钱小红 (军事医学科学院放射医学研究所北京100850) 在蛋白质组学研究中，蛋白质的分离和多肽的分离对蛋白质鉴定和相互作用的研究起着 决定性的影响。由于通常采用的二维电泳所固有的缺陷，如蛋白回收率低，存在歧视性问题， 费时、费力并且不容易实现自动化，研究人员便将注意力集中到各种色谱分离方法上以及不 同色谱模式的组合。在用反相液相色谱或疏水色谱对蛋白质进行分离时，发现柱长对蛋白质 混合物分离度的影响远比柱长对小分子混合物分离度的影响小，甚至出现短柱比长柱分离度 Shen等”’ 好的现象。但在用反相毛细管色谱对酵母蛋白酶解液进行分离和质谱鉴定时，Y．F 多个色谱峰，与分离蛋白质时一般采用5-10cm长的色谱柱有显著的不同，这就提出了用反 相液相毛细管色谱柱对多肽进行分离时柱长的选择问题。尽管一般分析柱与毛细管色谱柱在 柱内径上有巨大的差异，但每一种物质在两种规格色谱柱上的色谱行为是一致的，基于此， 我们用分析型反相色谱柱研究了柱长和梯度对多肽色谱保留行为的影响，以便为蛋白质