茶树叶片抗寒相关蛋白的筛选.pdfVIP

图表清单 图2-1 技术路线 15 图4-1 丙酮制干粉法蛋白电泳结果22 图4-2 改良丙酮沉降法与三氯乙酸-丙酮制干粉法蛋白电泳结果23 图4-3 云抗43 蛋白电泳结果23 图4-4 舒茶早蛋白电泳结果24 图4-5 差异蛋白点蛋白丰度25 图4-6 舒茶早枝条4 ℃蛋白电泳差异斑点25 图4-7 MALDI-TOF MS 分析质谱图（蛋白点1352）27 图4-8 MALDI-TOF MS 分析质谱图（蛋白点1785）…………………………….27 图4-9 MALDI-TOF MS 分析质谱图（蛋白点2080 ）……………………………28 图4-10 MALDI-TOF MS 分析质谱图 （蛋白点2176 ）…………………………..28 图4-11 MALDI-TOF MS 分析质谱图 （蛋白点1949）……………………………29 图4-12 MALDI-TOF MS 分析质谱图（蛋白点2055 ）…………………………..29 图4-13 MALDI-TOF MS 分析质谱图（蛋白点1352）…………………………..30 表3-1 SDS浓缩胶、分离胶配方 19 表4-1 差异蛋白点数据统计结果24 表4-2 差异蛋白质点质谱鉴定结果26 4 I 1 文献综述 1.1 植物抗寒性研究进展 温度是植物生长的必要条件，然而低温却是限制作物生产的重要因素，为此， 各国政府及研究部门一直都把植物低温适应性问题作为一个重要的研究课题。植 物低温胁迫是植物栽培中常常遇到的一种灾害,它不仅会导致植物产量的降低,严 [1] 重时还会造成植株的死亡 。植物对低温胁迫的响应是一种积极主动的应激过 [2] 程，低温诱导了相关基因的表达 ，从而改变膜脂成分，细胞膜系统是低温冷害 作用的首要部位,温度逆境不可逆伤害的原初反应发生在生物膜系统类脂分子的 [3] 相变上 。研究结果表明:植物的抗寒性提高是与可溶性糖、膜磷脂、游离氨基酸、 特别是脯氨酸、脱落酸(ABA) 、膜脂肪酸的不饱和度的增加或减少有关，并指出 [4-12] 维持膜系统功能结构的稳定性是维持和发展植物抗寒性的基础 。 1.1.1 植物生理生化变化与抗寒性的研究现状 低温会引起植物一系列的生理变化，对于起源于热带和亚热带的冷敏感植物, [13] 当温度降至引起冷害的临界温度时,光合作用则表现为强烈的抑制作用 。低温 胁迫对植物光合色素含量、叶绿体亚显微结构、光合能量代谢及光合系统活性等 一系列重要的生理生化过程都有明显影响[14-20] 。呼吸作用的强度与植物的抗寒性 有着密切的关系,低温导致异常呼吸,冷敏感植物的呼吸作用比抗冷植物的呼吸作 用更容易受到抑制。植物在刚受到冷害时,呼吸速率会比正常时还高,这是一种保 护作用, 以维持体内代谢和能量的供给,对抵抗寒冷有利。但时间较长以后,呼吸速 率便大大降低,反而比正常还要慢些,特别是不耐冷的植物或品种,呼吸速度大起 大落的现象特别明显。低温胁迫能使线粒体双层膜损伤破坏, 内嵴腔扩大和空泡 化,严重时内嵴被破坏[21-22] 。因此低温下破坏线粒体结构,氧化磷酸化解偶联,影响 有氧呼吸的强度,无氧呼吸比重增大。如果低温时间略长,积累的乙醇、乙醛类等 物质增多,可使组织中毒。生命活动的多种酶与植物的抗寒性有关。Gerloff(1967) 实验表明,经过充分锻炼的植物中出现两种新的过氧化物酶同工酶,而且过氧化物 [23] 酶和过氧化氢酶总的活性都增高了 。低温使原生质环流运动降低，低温使植 物的氧化磷酸化解偶联,ATP 含量明显下降,原生质的结构遭到破坏，影响原生质 [1]