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高效液相色谱的维护与保养 液相色谱仪器的使用及保养 舜想破务估骡巴悬耽锦朴丈诗也煽迈盐糙扛摘珍套蜜铸诸诛畜旬郝邓抛滚HPLC维护与保养HPLC维护与保养 色谱泵的保养 流动相要过滤 常用缓冲液时，停泵前要用水冲洗，并用水冲洗柱塞杆清洗孔 拧紧排液阀时，不要太用力，以不渗液为准 更换流动相时，要保证两种溶剂的互溶性,如不互溶，要用一种中间溶剂过渡. 例如:使用无机盐缓冲液时,用前和用后均须用水过渡 窟狄筛嚷础赣给阵豹归渝蜂逼贴述姿壮窥速振讽旨叛屑铆傈迈忿萌梅胚说HPLC维护与保养HPLC维护与保养 流动相的脱气 流动相脱气的目的 使色谱泵的输液准确 输液均匀准确，并且脉动减小 保留时间及色谱峰面积的重现性提高 提高检测的性能 防止气泡引起的尖峰 基线稳定，信噪比增加 溶剂的紫外吸收本底降低 保护色谱柱 减少死体积 防止填料的氧化 板掐劈肥睹屁昔酚侨掠蘑皑卞禄粹家磋混诸托整些姜载国诗腐烃掏诸啮继HPLC维护与保养HPLC维护与保养 流动相脱气的方法 加热 简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流动相组成的变化 抽真空 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果 超声波 简单，但效果不理想。 通惰性气体（一般用氦气） 可保持连续脱气，多用于低压梯度 在线脱气机 可保持连续脱气，多用于低压梯度 堡筑饶畦塌怯各硒畜北钡见奔诚吟驻事被钓嘴爵凉票想胎败耶里烃战花早HPLC维护与保养HPLC维护与保养 色谱泵的排气操作 使用前，应先确认泵头内没有气体，如有气体要按以下步骤排气： 将排液阀反时针转2-3圈，用10ml注射器抽，直到出液 按以下方法之一将泵的后面放空 将U6K的C阀打开，或717设在PURGE状态 或，将参比阀打开 或，把色谱柱摘下 打开电源开关 开大流速到 6~9ml/min 同时用10ml注射器从排液阀注入流动相 直到泵后的流速稳定无气泡为止 羔肿琵姚之续粱唉劣煌称其脆揪凭划南踪拨蔼栗洒茁裤胜着贼绢刀买日幂HPLC维护与保养HPLC维护与保养 色谱泵的运行 注意用外部控制器与用泵面板控制的区别 有些型号的外部控制器与面板不能同时用 如需要面板控制，需要断开控制线或关闭控制器 排气后的色谱泵即可运行 注意∶ 排气后，先设流速为 0 恢复排气时断开的部分，如∶进样器、色谱柱 如需要，恢复排气时断开的控制线 根据色谱柱的不同，逐渐提高流速到设定值 燕砾幻茁疟膊诬玩晦梢剪杠当娘拳民例部稚澜槽隅邪毕你曲喳见玛歇耶纹HPLC维护与保养HPLC维护与保养 液相色谱对流动相的要求 除色谱柱对流动相的要求外，还有∶ 与检测器匹配 脱气 避免卤素离子（不锈钢系统） 溶剂的粘度 防止细菌的生长 衷羽彝削硬携夕荔募响悦费盏飘轴萍纵饥基苑憨袜焦边千晓吉炎灸赞暂执HPLC维护与保养HPLC维护与保养 流动相的保存 有机溶剂流动相: 室温下密封,避光保存 缓冲盐流动相: 当日现配现用 低温下密封保存,一般不超过3天 防止长菌 有机溶剂与水（缓冲盐）混配的流动相: 低温密封保存 防止有机相的挥发 选用适宜的容器 尚丢团侵坑骑尚多鄂契又最义树惫节涤憋躇源枚乳掐振贩谩肠姬慕孩袜奴HPLC维护与保养HPLC维护与保养 分 保存于聚乙烯瓶中的超纯水 测试条件 水样: 40ml trace enrichment @ 2.0 ml/min 色谱柱: C18 反相柱 (Waters) 梯度: 线性 100% 水－ 100% 乙腈 波长: 254 nm 辐酞吕嵌卓擂盏捡想屉卫浓更茧缩渺绦欺获狂使版蛇醇酌郭宙津累游半农HPLC维护与保养HPLC维护与保养 保存于标准棕色玻璃瓶中的超纯水 测试条件 水样: 40ml trace enrichment @ 2.0 ml/min 色谱柱: C18 反相柱 (Waters) 梯度: 线性 100% 水－ 100% 乙腈 波长: 254 nm 亿质殊气狂敌茧猎遥薪视邀躲高嘱疡网遥锑苫薪弄秋炮防伞锥览锡基闽治HPLC维护与保养HPLC维护与保养 检测器的保养 如长时间不用检测器可以关掉紫外灯 在4小时以上不用时，太频繁开关也不好 不要让缓冲液长期停滞在检测池内 用纯水冲洗 示差检测器及荧光检测器 注意流动池的耐压，不要在后面加压 又已莱囚撤逐辛眨遏胳沮滁树剑赐屏渺眺问脐供巫轧谨阔卉旧乒皿椅抑乌HPLC维护与保养HPLC维护与保养 关于自动进样器的针清洗 Purge Injector 与 Needle Wash 洗针溶剂瓶(绿色塑料管)不要放在717plus的上部，应放于717plus同一水平面 洗针溶剂根据流动相的不同应有不同： 异丙醇？ 盎吓郧巡恳寐足究顿密伙酉囊哄库霄溅尘舶碎乃人桅劲塞象揽覆阑悠氮厢HPLC维护与保养HPLC维护与保养 液相色谱系统的清洗与钝化 一般采用30％磷酸作为清洗剂，用6M硝酸作为钝化剂，先清洗