转青鱼生长激素基因日本白鲫原代的研制.pdfVIP

第 15卷 第 2期 生命科 学研 究 VoI．15 NO．2 2011年 4月 IJifeScienceResearch Apr．2011 转青鱼生长激素基因日本 白鲫原代的研制 冯 浩，傅永明，吴 慧，刘 筠，刘少军 (湖南师范大学生命科学学院，中国湖南长沙410081) 摘 要 ：构建 由青鱼 ／3-actin基 因启动子和青鱼生长激素 (GH)基 因精确拼接 的 “全鱼”基 因pbcAbcGHc．并采 用显微注射法将pbcAbcGHc导八 日本 白鲫的受精卵中．对照养殖结果显示 l50 日龄 代转基 因 日本 白鲫的 平均体 重是对照组 1．37倍 ，平均体 长是对照组 1．07倍．选择 3O尾 代转基 因 日本 白鲫 ，PCR方法检测 出外 源青鱼G 基 因在 Pn代转基 因 日本 白鲫尾鳍基 因组DNA 中的整合率为90％；在一尾生长速度显著的转青鱼 G 基 因日本 白鲫 的肌 肉、肝脏两种组织中可检测到外源青鱼 GH基 因的转录．Pn代转青鱼G日基 因 日本 白 鲫Pn的成功获得为建立转青鱼 GH基 因日本白鲫纯系奠定 了基础． 关键词：转基因：日本白鲫；生长激素 中图分类号 ：$961．6 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—7847(2011)02-0158—07 TheDevelopmentofP0ofBlackCarpGH geneTransgenic JapaneseCrucianCarp FENGHao，FUYong—ming，WUHui，LIUYun，LIUShao-jun (CollegeofLfieSciences，HunanNormalUniversity，Changsha410081，Hunan，China) Abstract：The “allfish”transgene (pbcAboCHe)containingthepromoterofthe 一actingeneandcDNAof growthhormone(GH)geneofblackcarpwasmicroinjectedintofertilizedeggsofJapanesecruciancarp(JCC)． ThecontrastcultivationresultsshowedthatthemeanbodyweightoftheP0oftransgenicJCCof150dayswas 1．37timesofthecontrolgroup．TheaveragebodylengthoftheP0oftransgenicJCCof150dayswas1．07timesof thecontrolrgoup．30transgenicjccof150dayswerechosenfortailfingenomicDNA isolationandsubse— quentlyPCRdetection．TheratiooftheexogenoustransplantgeneintegratinginthegenomeoftheJCCtailfinis 90％．ThetranscriptionofexogenousblackcarpGH genecouldbedetectedinthetotalRNA ofthemuscleand liverfromoneJCCwithoutstandingrgowthrate．TheP0oftransgenicJapanesecruciancarpwithhigherrgowth ratehadbeensuccessfullydeveloped，whichmadethesolidfoundationofrtheestablishmentofthepurelineof thetransgenicJCC． Keywords：transgenic；Japanesecruciancarp；rgowthhormone