阳离子交换色谱及动态涂层毛细管电泳法检测牛奶中乳铁蛋白含量.pdfVIP

第33卷 第3期 分析测试学报 V01．33No．3 2014年3月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrumentalAnalysis) 339～343 doi：10．3969／j．issn．1004—4957．2014．03．017 阳离子交换色谱及动态涂层毛细管 电泳法检测牛奶中乳铁蛋 白含量 赵凌国 ，尤 俊 ，梁肇海 ，李 可 ，丘 汾 ，曾胜波 (1．深圳市福田区疾病预防与控制中心，广东 深圳 518040；2．武汉大学 化学与分子科学学院，湖北 武汉 430072) 摘 要 ：建立了阳离子交换色谱及动态涂层毛细管电泳检测牛奶中乳铁蛋白含量的新方法。通过 purolite c115一E弱酸性离子交换树脂对牛奶中的乳铁蛋白进行提取，运用季铵化纤维素(Qc)对毛细管动态涂层并 测定乳铁蛋白含量。实验结果表明，该动态涂层能有效抑制毛细管内壁对乳铁蛋白的吸附。通过对 QC浓度、 运行缓冲液 pH值、孵育时间等萃取和电泳条件的优化 ，实现了对牛奶样品中乳铁蛋白的定量分析。结果显 示，低、中、高3个浓度组的加标回收率为87％一112％，相对标准偏差(RSDs)为4．4％一12．1％。该方法分 析速度快、分离效率高、所需牛奶样品少，适用于牛奶中乳铁蛋白的分离分析。 关键词：阳离子交换色谱；毛细管电泳 ；动态涂层 ；乳铁蛋白 中图分类号：0657．7；0629．73 文献标识码 ：A 文章编号：1004—4957(2014)03—0339—05 DeterminationofBovineLactoferrininMilkbyCationExchangeChromatography andDynamicCoatingCapillaryElectrophoresis ZHAOLing—guo ，YOUJun，LIANGZhao—hai，LIKe，QIUFen，ZENGSheng．bo。 (1．CenterforDiseasePreventionandControlofFutianDistrict，Shenzhen 518040，China；2．Collegeof Chemist~andMolecularSciences，WuhanUniversity，Wuhan 430072，China) Abstract：A dynamiccoatingcapillaryelectrophoresismethodwithcationexchangechromatography wasdevelopedforthedeterminationofbovinelactoferrin(bLF)inmilk．ThebLFwasisolatedfrom milkbyusingpuroliteC115一E cationexchangeresin，andthenquantitativelyanalyzedinthecapil- larycoatedbyquaternizedcelluloses(QC)．EffectsofQcconcentrationsandpHvaluesoftherun— ningbufferontheseparationofbLFbycapillary electrophoresiswereinvestigated．Itwasshownthat theuseofQccoatinginCEcoulddrasticallyreducetheadsorptionofbLFontheinnersurfaceof fusedsilicacapillary．Qccannotonlycoverthesilanolgroupsonthecapillary innersurface，butal— SOrepelthebasicproteinselectrostaticallytopr、eventbLFproteinadsoprtion．Aftertheoptimization