任务十五测定食品加工和包装中有害物质含量资料.ppt

食品分析与检验技术 食品分析与检验技术 化学工业出版社 任务十五 测定食品加工和包装中有害物质含量 李京东 余奇飞 刘丽红 技能目标 1．会测定食品中三聚氰胺含量。 2．会测定食品中苏丹红含量。 3．会测定食品塑料、纸包装及橡胶用品中渗出物含量。 知识目标 1．明确食品中三聚氰胺的测定原理。 2．明确食品苏丹红测定测定原理。 3．明确食品包装材料渗出物测定条件。 项目一：测定食品中三聚氰胺 一、案例 二、选用国家标准 GB/T22388-2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法——高效液相色谱法。 三、测定方法 1．样品处理 （1）液态奶、奶粉、酸奶等乳制品：精确称取样品2.00g置于50mL具塞塑料离心管，分别加15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，大于4000r/min离心10min，取上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加5mL水混匀用于待净化液。 （2）奶酪、奶油和巧克力等制品：精确称取样品2.00g置于研钵中，加入试样质量4～6倍海砂研磨成粉状，转移至50mL具塞塑料离心管中，同时用15mL三氯乙酸溶液数次清洗研钵，将清洗液转入离心管中，离心管中加入5mL乙腈，其余同上操作，制备待净化液。 2．样品净化 将待净化液转移至固相萃取柱中（固相萃取柱制备方法：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物，60mg，3mL，或相当者。）使用前依次用3mL 甲醇、5 mL水活化，抽至近干，用6mL氨化甲醇溶液洗脱，流速不超过1mL/min，洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物（相当于0.4g样品）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过0.2μm微孔滤膜后，得净化可测定样品。 3．测定 （1）高效液相色谱参考条件 色谱柱： C8柱，250 mm×4.6 mm（i.d.），5μm，或相当者 C18柱，250 mm×4.6 mm（i.d.），5μm，或相当者。 流动相： C8柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（85+15，体积比），混匀。 C18柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（90+10，体积比），混匀。 流速：1.0mL/min。 柱温：40℃。 波长：240nm。 进样量：20μL。 （2）标准曲线的绘制 用流动相将三聚氰胺标准储备液稀释得浓度为0.8、2、20、40、80μg/mL的标准工作液，由低到高浓度进样检测，做标准曲线。 （3）定量测定：将待测液按要求进样检测。 4．结果计算 式中 X——试样中三聚氰胺的含量，mg/kg； A——样液中三聚氰胺的峰面积； c——标准溶液中三聚氰胺的浓度，μg/mL； V——样液最终定容体积，mL； As——标准溶液中三聚氰胺的峰面积； m——试样的质量，g； f——稀释倍数。 5．试剂 5%氨化甲醇溶液、乙腈、离子对试剂缓冲液、1%三氯乙酸、甲醇水溶液、三聚氰胺标准储备液、海砂、氮气。 6．仪器 高效液相色谱（HPLC）仪、分析天平、离心机、超声波水浴、固相萃取装置、氮气吹干仪、涡旋混合器、具塞塑料离心管、研钵。 四、相关知识 （一）食品中三聚氰胺测定——高效液相色谱法原理 试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。 本法摘自GB/T22388-2008，适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定量测定。 （二）注意事项 1．本试验中所用试剂除甲醇、乙腈、辛烷磺酸钠为色谱纯外，其余均为分析纯。 2．本试验用水为GB/T6682规定的一级水。 3．待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。 五、测定食品中三聚氰胺的方法 乳及乳制品中三聚氰胺的国家标准检测法高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS），气相色谱-质谱联用法（GC-MS和GC-MS/MS）等，均适合于乳及乳制品中三聚氰胺的定性确定。 项目二：测定食品中苏丹红 一、案例 二、选用国家标准 GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法——高效液相色谱法。 三、测定方法 1．样品处理 （1）粉状样品（如辣椒粉等）：准确称取样品1.000～5.000g于三角瓶中，加入10～30mL正己烷，超声过滤5min，再用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下，慢慢加入氧化铝层析柱中（氧化铝层析柱制备方法，在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷预淋洗，洗净柱中杂质后，备用），为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在层析过程保持柱的湿润，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱；控制