荧光分光光度计的原理与应用.pptVIP

荧光分光光度计的原理及应用 一、分子荧光的产生 二、激发光谱与荧光光谱 2.荧光光谱 三、荧光强度和溶液浓度的关系 三、荧光强度和溶液浓度的关系 四、荧光、磷光分析方法的特点 第二节 荧光分光光度计的组成 仪器光路图 第三节 荧光分析法的应用 作业 P14 3 * * 1.电子激发态的多重度 单重激发态S：电子自旋方向和处于基态轨道的电子配对。 第一节 荧光分光光度法原理 三重激发态T：电子自旋方向和处于基态轨道的电子平行。 2. 分子能级与跃迁 基态(S0)→激发态(S1、S2激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射。 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势； 磷光 内转移 外转移 系间跨越 延迟荧光 传递途径 辐射跃迁 荧光 振动弛预 无辐射跃迁 S2 S1 S0 T1 吸 收 发 射 荧 光 发 射 磷 光 系间跨越 内转换 振动弛豫 能 量 l 2 l 1 l 3 外转换 l ?2 T2 内转换 振动弛豫 1.荧光的激发光谱曲线 固定测量波长(选最大发射波长),化合物发射的荧光(磷光)强度与激发光波长的关系曲线 （图中曲线I ） 。激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大； 固定激发光波长, 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线(图中曲线II)。 问题：荧光(磷光)的激发光波长