10.色谱-GPC分析.pptVIP

色谱法 材料与化工学院 焦明立 应用1： 白酒的主要成分 乙醇和水（占总量的98％－99％） 溶于其中的酸、酯、醇、醛等种类众多的微量有机化合物（占总量的1％－2％）作为白酒的呈香呈味物质，却决定着白酒的风格 白酒成分出峰顺序（程序升温，小口径毛细管柱，仅供参考）： 1.乙醛??2.正丙醇??3.异丁醛??4.甲酸乙酯??5.乙缩醛+乙酸乙酯?? 6.甲醇 7.异戊醛??8.乙醇??9. 2-戊酮??10.叔戊醇（内标I） 11.仲丁醇??12.丁酸乙酯??13.正丙醇??14. 1,1-二乙氧基异戊烷?? 15.异丁醇??16.乙酸异戊酯??17.戊酸乙酯??18.2-戊醇 19.正丁醇??20.乙酸正戊酯(内标2)??21.活性戊醇??22.异戊醇? 23.己酸乙酯??24.正戊醇??25. 醋翁??26.庚酸乙酯??27.乳酸乙酯 28.正己醇??29.三甲基毗嗪??30.辛酸乙酯??31.乙酸??32.糠醛? 33.四甲基??34.苯甲醛??35.丙酸 36.2,3-丁二醇(左消旋) 37.异丁酸 38. 2,3-丁二醇(内消旋)??39. 1,2-丙二醇 40.丁酸??41.异戊酸?? 42.戊酸?43. 2-乙基正丁酸(内标3)??44.苯乙酸乙酯??45.己酸 46. B-苯乙醇 47.庚酸 一、GPC分离原理——体积排除理论 二、GPC结构和仪器工作示意图 试样和溶剂注入系统，主要包括：溶剂储槽、脱气室、过滤器、精密计量泵、进样装置； 色谱柱系统，包括柱温控制箱； 检测系统——各种检测器（RI、UV等）； 数据处理系统（包括模数转换器、计算机、打印机/绘图仪等）； 控制系统。 * * 目录 色谱法基础知识 背景、分类、原理 凝胶渗透色谱 俄国植物学家Tswett（茨维持）于1903年在研究植物叶子的组成时，用碳酸钙作吸附剂，分离植物干燥叶子的石油醚萃取物。 把干燥的碳酸钙粉末装到一根细长的玻璃管 然后把植物叶子的石油醚萃到液倒到管中的碳酸钙上 萃取液中的色素就吸附在管内上部的碳酸钙里 用纯净的石油醚洗脱被吸附的色素 管内的碳酸钙上形成三种颜色的6个色带，当时茨维特把这种色带叫作“色谱”（Chromatographie）。 在这一方法中把玻璃管叫作色谱柱，碳酸钙叫作固定相纯净的石油醚叫作流动相。把茨维特开创的方法叫液固色谱法。 产生背景 植物叶色素分离图 黄色层（胡萝卜素） 充以碳酸钙粉末 石油醚 色素提取液 黄绿色层 黄色层（叶黄素） 绿色素（叶绿素） 色谱法是一种分离分析方法，它利用物质在两相中分配系数的微小差异进行分离。 当两相做相对移动时，使被测物质在两相之间进行多次分配，这样原来的微小差异产生了很大的效果，使各组分分离，以达到分离分析及测定一些物理化学常数的目的。 色谱定义 　它是建立在分配基础上的分离分析过程。 利用不同组分在两相中（静止的一相称固定相，运动的相称流动相）分配系数等性质的微小差别，连续多次在两相间进行质量交换，使不同组分得到分离。 各组分通过色谱分离，再送入检测器，经检测器检测以达到分析目的。最终得到由记录器记录下来的色谱图。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 两相及两相的相对运动 构成了色谱法的基础。 必要条件：不同组分性质上的微小差别。 充分条件：微小差别的组分在两相间进行了千次甚至几十 万次的质 量交换。 技术基础 色谱中共有两相，即固定相和流动相。 气相色谱 流动相为气体：固定相为固体Gas –solid Chromatography 固定相为液体Gas-liquid Chromatography 液相色谱 流动相为液体：固定相为固体Liquid-solid Chromatography 固定相为液体Liquid-liquid Chromatography 分类 1． 按两相所处的物理状态分类 （1）分离效率高 复杂混合物，有机同系物、异构体。手性异构体。 （2） 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3） 分析速度快 一