第三章生物敏感膜的制备.pptVIP

* 五、LB(Langmuir-Blodgett)膜法 （一）LB膜 把液面上有序排列的有机化合物逐层地转移到固定基片上，在分子水平上制造出按有序排列的分子组合体，成为单分子层或几个多分子层的修饰薄膜。 * （二）LB膜的特点 1.膜厚度可精确控制，可精确到纳米级； 2.膜内分子排列有序而致密，均一性好； 3.脂质双层膜同生物膜结果相似，是理想的仿生膜，具有极佳的生物相容性； 4.可把活性物质固定在LB膜的预定位置，制成具有特殊功能的生物传感器。 制备LB膜的装置示意图 （三）LB膜的制备过程及制备方式 制膜过程示意图 * 按照转移（挂膜）式电极表面相对于水面的相对运动方向，可将LB膜的制备分为X,Y和Z三种方式。 * X法：将电极表面垂直于水面向下插入挂膜，使 成膜分子的疏水端指向电极。 * Y法：将电极上下作往返运动挂膜，使各层分子的亲水端和疏水端依次交替指向电极。 * * Z法：将电极从水下提出挂膜，使成膜分子的亲水 端指向电极。 * （四）LB酶膜的制作过程 若把酶溶于水中，在水面上展开的脂质单分子膜将吸引水中的酶分子，沿水平面对其表面积的压缩会使单位面积上的酶密度增加，然后经过挂膜，随着LB膜在电极上的沉积，酶就被固定在电极表面上。 * LB酶膜的制作过程 * （五）单层、多层和混合型LB膜修饰电极 若在电极表面挂一单分子层膜，表现出准二维特性，称单分子层LB膜修饰电极； 将相同或不同的成膜分子在电极表面重复挂膜积叠成多层膜，具有三维的超结构，称多分子层LB膜修饰电极； 将两种或两种以上的不同分子按一定比例混合后形成LB膜，再挂在电极上称混合型LB膜修饰电极。 * 用LB膜制成的敏感器件响应时间快且灵敏度高，光电转换效率也高，所以特别适合于制备化学、生物或仿生传感器件用于分子识别。 LB膜法已成功地用于发展仿生传感器、酶、免疫等生物传感器。 * 思考题： 1. 什么是LB膜，LB膜的制备方式有哪些？ * * * 溶胶 无固定形状 粒子自由运动 凝胶 固定形状 粒子按一定网状结构固定不能自由运动 溶胶与凝胶的结构比较 溶胶-凝胶的典型例子： 豆浆（sol） 豆腐（gel） * （2）溶胶—凝胶的制备 ●金属或半金属醇盐在水、互溶剂（一般为醇）及催化剂（酸或碱）发生水解反应，形成羟基化的产物和相应的醇。 ●未羟基化的烷氧基与羟基或两羟基间发生缩合形成胶体状的混合物，即溶胶，水解和缩合过程同时进行； ●最后胶粒间发生聚合、交联，使溶胶黏度逐渐增大，形成凝胶。 * * 硅烷聚合物凝胶的立体构造 * 图 溶胶-凝胶法包埋活性分子的过程 溶胶—凝胶法包埋生物活性分子通常只是物理结合过程。 溶胶溶液 将活性分子加入溶胶溶液 凝胶开始形成 活性分子被包埋在凝胶中。 * （3）溶胶—凝胶法的特点 光学透光性强； 无电化学降解，具有导电性且易控制； 热稳定性好，具有化学惰性； 具有一定的刚性； 有足够的水，为生物组分提供水溶液的微环境； 能均匀地掺入生物组分，实现分子水平上的均匀掺杂。 * 四、共价键固定法 将生物组分通过共价键与不溶性载体（转换器探头）结合而固定的方法称共价键固定法，或称载体结合法。包括3个步骤： ●基底电极表面的活化 ●生物分子的偶联 ●剩余价键的封闭及除去键合疏松的组分。 载体修饰需满足： ● 化学连接稳定 ● 连接长度足够长，减小固相表面的空间位阻 ● 不产生非特异性结合 * (1)直接化学固定法 将基体表面先经过化学处理或修饰，然后将生物功能物质以共价、离子或配位等方式结合固定于电极表面。 * （2）硅烷化-双功能基团试剂偶联法 采用硅烷化试剂修饰基体表面，使其带上氨基或羟基，然后用双功能偶联剂（如戊二醛）与生物活性分子相结合而使生物组分固定的方法。 * 硅烷化—双功能基团试剂偶联法 * ⑶自组装（Self assembling，SA）膜法 基于分子的自组装作用，在固体表面上自然地形成高度有序的单分子层的方法。 有些分子通过化学键相互作用能自发吸附在固/液和固/气表面，形成热力学稳定和能量最低的有序膜。 发生自组装的条件： 动力：提供能量 导向作用：分子在空间的大小和方向上达到分子重新排列的要求，从无序到有序的重新重组。 自组装单层膜的形成示意图 * 自组装膜的类型： ● 脂肪酸在金属氧化物表面