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第一部分 基本实验
实验一 显微镜的构造和使用
[目的要求]
了解普通光学显微镜的基本构造,能够规范和较熟练地使用和维护。
[实验原理]
光学显微镜利用光学成像原理观察生物体的结构。光线通过聚光器透射过载物台上的玻片标本,进入物镜,形成一个放大的、上下倒立的实像。这一倒立的实像经过目镜的放大,映入眼球内成为放大的倒立虚像。
[实验内容]
双筒光学显微镜的构造和使用与维护方法。
[实验材料和用品]
生物玻片标本
显微镜、 擦镜纸。
实验二 细胞的制片与观察和细胞大小的测量
[目的要求]
1、学习掌握涂片法制作动物细胞显微玻片标本。
2、学习掌握线粒体活体染色法和显示细胞内DNA和RNA的方法。
3、学习掌握测量细胞大小的基本方法。
4、了解动物细胞的基本结构。
[实验原理]
1、线粒体活体染色法
线粒体内膜和嵴膜含有细胞色素氧化酶系统,用詹纳斯绿B对线粒体进行专一性活体染色时,线粒体内的细胞色素氧化酶可使詹纳斯绿B染料始终处于氧化态而呈蓝色,而线粒体周围细胞质中的詹纳斯绿B被还原呈无色。
2、细胞内DNA和RNA的显示
核酸均为酸性,对碱性染料派诺宁和甲基绿具有亲和力。用这两种染料混合液处理细胞时,由于DNA和RNA聚合程度不同,甲基绿分子有两个相对的正电荷,与聚合程度较高的DNA分子有较强的亲和力,可使DNA分子染成蓝绿色,而派诺宁分子中仅一个正电荷,可与低聚分子RNA结合使其染成红色。这样细胞中的DNA和RNA便被区别开来。
3、细胞大小的测量
镜台测微尺(台尺)是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般是将1mm等分为100格,每格长10μm,专用于校正目镜测微尺(目尺)每格的相对长度。
目尺是一块可放在目镜内隔板上的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,有等分为50小格和100小格两种,用以测量经显微镜放大后的细胞物像。
由于不同显微镜镜筒长度不同,或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,目尺每小格所代表的实际长度也不一样。因此,用目尺测量细胞大小时,必须先用台尺校正,以计算出在一定放大倍数目镜和物镜下目尺所代表的实际长度,然后才能用来测量细胞的大小。
[实验内容]
1、制备口腔粘膜细胞标本,观察细胞形态结构。
2、活体染色显示线粒体。
3、细胞中DNA和RNA的显示。
4、利用显微镜测微技术测量动物(蛙、鸡或鱼)红细胞及其细胞核直径,计算细胞核质比。
[实验材料和用品]
人口腔黏膜细胞、大鼠,蛙、鱼或鸡血涂片标本。
显微镜、镜台测微尺、目镜测微尺、无菌牙签、解剖器具、酒精灯、染色架、载玻片、盖玻片、滴管、吸水纸。
0.9 %生理盐水、1%碘液、0.02 %詹纳斯绿B、醋酸洋红染液、甲基绿-派洛宁染液、卡诺氏固定液、丙酮、二甲苯、中性树胶、蒸馏水、水。
实验三 动物组织的制片及观察
[目的要求]
1、掌握动物组织平铺片、分离片等临时装片和涂片的一般制作方法。
2、掌握动物的四类基本组织结构特点,理解组织结构与功能的密切关系。
[实验原理]
整个动物体或组织器官大部分都是不透明的,无法在显微镜下观察,需经过生物制片方法,减少将要观察的材料的厚度和体积,使材料变成薄片,或将组织分离成单个细胞,使光线能透过,然后通过染色,制备成玻片标本,才能用显微镜进行研究 。
[实验内容]
1、制备和观察蛙肠系膜平铺片、蝗虫肌肉组织分离装片和蛙血涂片。
2、动物四大组织玻片标本观察、示范、多媒体演示(可根据具体情况酌情选做)。
[实验材料和用品]
活蛙、蝗虫浸制标本,动物各组织的玻片标本(一般H·E染色),动物组织多媒体课件。
显微镜、电脑、液晶投影仪、屏幕、解剖器具、蜡盘、载玻片、盖玻片、染色缸、玻片架、大头针。
0.65%生理盐水、1%硝酸银溶液、甘油、香柏油、0.1%亚甲基蓝、甲醇、姬姆萨染液、蒸馏水、乙醚。
实验四、五 无脊椎动物的比较解剖与进化
[目的要求]
1、掌握在动物演化中具重要地位的几类无脊椎动物的一般解剖方法(蠕形动物、虾类、昆虫等);了解各类无脊椎动物一般特征和进步性特征。培养独立实验能力。
2、.学习用比较
4、引导学生探讨动物进化的影响因素和机制,启迪学生的探索欲望和创新意识。
5、认识无脊椎动物各门的常见动物。
6、学习节肢动物检索表的应用。
[实验原理]
通过外形,胚层,体腔,附肢,消化系统,呼吸系统,神经系统和感觉器官,循环系统、生殖系统等的比较解剖,探讨无脊椎动物体制结构和器官系统的演化发展及其与环境的密切联系,在演化中不同器官系统间的相互关联,以及动物体结构与功能统一和动物的整体性等规律。
[实验内容]
1、比较解剖:
(1)水螅带芽整体装片、过精巢、卵巢横切片、示神经整体装片的观察
(2)活涡虫、涡虫横切面玻片标本的观察
(3)蛔虫的外形观察,内部解剖和横切面玻片标本的观察
(4
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