第1节细胞增殖3.ppt

观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 1、实验原理： ①观察部位：在高等植物体内，有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。 ②分裂过程：因各个细胞的分裂是独立进行的，故在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞。 ③观察过程：通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体的存在状态，就可以判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期，进而认识有丝分裂的完整过程。 ④染色原理：染色体容易被碱性染料着色。 2、目的要求： ①制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。 ②观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期， 比较细胞周期不同时期的时间长短。 ③绘制植物细胞有丝分裂简图。 4、方法步骤： 3、材料用具： 　　洋葱根尖，显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪刀，镊子，滴管，质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，质量浓度为0.01g/ml的龙胆紫溶液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。 （1）洋葱根尖的培养（课前做好准备） 问题： 　　你是怎样培养洋葱根尖？在培养过程中，应注意哪些问题？ 　　在实验课前3～4天，取洋葱一个，放在广口瓶上，装满清水，让洋葱的底部接触瓶内的水面。把广口瓶放在温暖的地方培养。待根长约5cm时，取健壮的根尖制成临时装片。注意的问题：应选择底盘大的洋葱做生根材料；剥去外层老皮，用刀削去老根，注意不要削掉四周的根芽；培养时注意每天换水1～2次，防止烂根。 （2）装片的制作 问题：取材的时间最好在什么时候进行？解离过程中，应注意哪些问题？解离后细胞是否仍保持活性？解离的目的是什么？ 　　在上午10时至下午2时，剪取洋葱根尖2～3mm，立即放入盛有盐酸和酒精混合液（1:1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min，至根酥软为止。解离中，应注意时间的把握，不能太长也不能太短。解离太长使细胞的结构破坏，影响制片的效果，太短则不易使细胞分离，观察时细胞容易重叠。解离后细胞已被盐酸杀死，不具备活性。目的是组织中细胞相互分离开来。 ①取材与解离 ②漂洗 问题：为什么要进行漂洗？怎样进行漂洗？ 　　由于染色剂是碱性染液，如不漂洗，酸碱发生反应，不利于着色；同时也是为了洗去药液，防止解离过度。用镊子把酥软的根取出，放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。 ③染色 　　把根尖放进盛有0.01或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。染色3~5min左右。染色的时间也要把握好，染料进入细胞是靠扩散，时间短了，染色体着不上色；时间长了，除染色体之外其他结构也可能和染料结合，使得背景和染色体颜色反差不大，都观察不到染色体。因此，染色的目的是使细胞中的染色质或染色体着色，利于观察。 问题：怎样进行染色？染色的目的是什么？ ④制片 　　用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片中央，加1d清水。并用镊子将根尖弄碎，盖上盖玻片；在盖玻片上加一片载玻片，用拇指轻压载玻片。 　　压片时用力要适当，过重会将组织压烂，过轻则细胞不易分散。 （3）洋葱根尖细胞有丝分裂的观察 ①低倍镜观察 　　在低倍镜下，先找到分生区细胞，观察细胞的形态特点，并能描述所看到的现象。 问题：怎样制作临时装片？应注意什么？ 　　处于间期的细胞最多，因间期持续的时间最长。确认细胞周期中各时期的长短，就看在这一时期中观察到的细胞的多少。 ②高倍镜观察 问题：在一个视野中能不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程？能不能找全有丝分裂各时期的细胞？如何操作才能找全各个时期的细胞？ 　　在一个视野中不能观察到一个细胞有丝分裂的连续过程，因细胞在解离时已经被杀死，不再进行细胞分裂了。不能，因在一个视野中，我们只能找到某一时期的细胞图像，要想看全各时期的细胞，应移动装片，在不同的视野中寻找。 问题：在你的观察结果中，处于哪一时期的细胞最多？怎样确认一个细胞周期中各个时期的长短？ 问题：仔细统计两个样本视野中处于各时期的细胞数，并填于记录表中？ 细胞周期 样本1 样本2 总数 每一时期的细胞数/计数细胞的总数 间期 分 裂 期 前期 中期 后期 末期 计数细胞的总数 同学们再见！ 2010年12月26日　制作