电泳技术的临床应用2011-02_培训课件.pptVIP

下列参数会影响本周氏蛋白的毒性 : 等电点 (pI): - When the pI is 6, the Bence Jones will interact strongly with the Tamm-Horsfall protein. - If the pI is low, there will be little interaction with THP. 轻链形成的聚合体: - (polymers can reach a MW of 900 kD). 轻链的初级结构: - The primary structure of the free light chains is also involved in the toxicity. This is due to the variable region of the light chain. 尿液的检测原则 当血液中检测到M蛋白时: - 进行24H尿蛋白检测 - 电泳 + IF/BJ - 对异常峰进行鉴定 - 对患者进行随访, 目的是确认药后疗效和肾脏损伤程度 重点 : 对患者定期随访检测, 便于及时掌握患者肾脏损伤程度 总结 电泳技术在同工酶分析方面的应用 The Assay and the Clinical Application of Isoenzymes 同工酶的定义 同工酶是以多种分子形式存在于机体的 催化功能相同 分子结构不同 检测同工酶的目的 检测同工酶活力比单测定酶的总活力更具有脏器特异性和高灵敏性等优点, 因而提高了临床诊断价值 早期诊断某些疾病, 阳性率高, 特异性强 可以估计病情严重性和判断预后 目前广泛应用于临床检测中的同工酶 乳酸脱氢酶同工酶(Lactate dehydrogenase, LDH) 肌酸激酶同工酶(Creatine kinase, CK) 碱性磷酸酶同工酶(Alkaline phosphatase, ALP) 天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase, AST) γ - 谷氨酰转移酶(γ- glutamyltransferase, GGT) ? - 淀粉酶同工酶(? -Amylase, AMY) 同工酶的分析方法 由于同工酶的一级结构 (氨基酸序列)及高级结构(构象)的不同, 因此, 一种酶的各个同工酶在化学, 物理化学, 生物化学等方面的性质也就有所差异, 这些差异就提供了分析和鉴定同工酶的理论基础 在研究同工酶的所有方法中，电泳法的使用最为广泛。因为此法简便、快速、分离效果良好，并且一般不会破坏酶的天然状态 乳酸脱氢酶同工酶(LDH) 乳酸脱氢酶是能催化乳酸脱氢生成丙酮酸的酶 每种LD同功酶都是由4个亚单位(肽链)组成的四聚物. 这些亚单位中, 有两类分别专属M(肌肉)和H(心脏). H4 = LD1 H3M = LD2 H2M2 = LD3 HM3 = LD4 M4 = LD5 临床意义 LDH1和LDH2升高： 见于急性心肌梗塞(LDH1／LDH21)、病毒性心肌炎、风湿性心肌炎和克山病 LDH5和LDH4升高：??? (1)急性肝炎：LDH5明显升高，LDH4轻度增高；??? (2)急性肝萎缩：LDH5和LDH4都明显升高；??? (3)慢性肝炎，肝硬化：LDH5轻度升高；??? (4)骨骼肌急性损伤、皮肌炎：LDH5和LDH4都升高；??? (5)前列腺癌：LDH5升高，LDH5／LDH11 LDH的五种同工酶都升高：见于胃癌、结肠癌和胰腺癌. 肌酸激酶(CK)同工酶的组成(广泛存在于各类组织中,与ATP形成有关)骨骼肌:主要为CK-MM,不含CK-BB,仅有少量CK-MB（＜3％）心肌:主要为CK-MM,CK-MB占CK总量的14％-42％ 脑组织以及其中含平滑肌器官:几乎全部是CK-BB，它同时也是人胚胎中CK的主要存在形式。  Macro CK Type I CK BB Application point CK MB CK MM Macro CK Type II 脑组织及其它平滑肌 : CK-BB 0% 心肌细胞 : CK-MB 0~3% 骨骼肌细胞 : CK-MM 97~100% CK-MB的阳性决定水平为 5% 脑脊液蛋白研究 中枢合成免疫球蛋白是中枢神经系统疾患的一个重要信号，主要用于对中枢神经系统疾患进行诊断和鉴别诊断 如：多发性硬化症、痴呆、脊髓炎、副肿瘤性脑炎、神经性梅毒等 现阶段临床